论文部分内容阅读
蛋白质是重要的生物活性物质，它参与生命体每一步反应和活动。蛋白质的定量测定是研究蛋白质的基础，因此建立快速、简便、灵敏、干扰小的测定蛋白质的方法具有重要意义。电化学分析法具有灵敏度高、仪器简单、方法灵活多样等特点，将电分析化学技术应用于生物活性物质的研究，开拓了电分析化学的新的领域——生物电分析化学。
本文采用单扫描极谱法研究蛋白质的测定方法。在溶解氧存在下，建立了血清白蛋白和血红蛋白的检测方法，并对其机理进行了研究。蛋白质的同时测定文献报道较少，论文初步研究了血清白蛋白和血红蛋白的同时测定。
本硕士学位论文的主要工作是：
1.基于溶解氧条件下血清白蛋白的平行催化波研究
在pH 6.6的磷酸盐缓冲溶液中，基于溶解氧条件下，建立了血清白蛋白的测定方法。该波一阶导数波高与0.08～4mg/L范围内牛血清白蛋白（BSA）或人血清白蛋白（HAS）呈线性关系，检出限分别为0.05mg/L。运用该法测定了人血清样品中蛋白质含量，结果满意。
2.基于溶解氧条件下血红蛋白的一种新的平行催化波研究
在5 × 10-3mol/LNaOH溶液中，血红蛋白于-0.62V(vs.SCE) 处会产生一灵敏的还原波。该波二阶导数波高与血红蛋白在0.05～21mg/L呈线性关系，相关系数为0.999，检测限为0.02mg/L。基于此还原波，建立了一种简单、快速、可靠的检测血红蛋白的新方法。将该方法分别用于血液和尿液样品的检测，结果可靠。机理研究表明，血红蛋白于-0.62V(vs. SCE) 处产生还原波是一种新的平行催化波，它是基于血红蛋白中的HbFe(III)离子被还原成HbFe(II)，HbFe(II)又被溶解氧化学氧化为HbFe(III)这样一个循环过程。该波与平行催化氢波以及血红蛋白中的HbFe(III)离子被还成HbFe(II)的还原波存在在明显不同。
3.极谱法同时测定血红蛋白和血清白蛋白
用单扫描极谱法在加入1.5％亚硫酸钠的0.08mol/L磷酸盐缓冲液(pH=6.8)中同时测定了牛血红蛋白和牛血清白蛋白。结果表明，在最佳实验条件下，牛血红蛋白和牛血清白蛋白的量在2:1到5:1之间的任意比例时，牛血红蛋白在6～24mg/L（r=0.995）和牛血清白蛋白在2～8mg/L(r=0.996)可以同时测定两种蛋白，检测限分别为0.3mg/L，0.1mg/L。在同样条件下，人血红蛋白的线性范围在6～33mg/L(r=0.995),相应的人血清白蛋白的线性范围为2～11mg/L(r=0.998)，两种蛋白可以同时测定，检测限分别为0.3mg/L，0.2mg/L。