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本文对兔病毒性出血症(RHD)灭活疫苗和兔A型魏氏梭菌病灭活疫苗的干粉化及其免疫效果进行了研究,同时建立了兔A型魏氏梭菌毒力测定的替代试验方法和卵磷脂水解抑制试验测定家兔抗A型魏氏梭菌d毒素的试验方法。 (1)兔病毒性出血症组织灭活干粉苗的研究结果表明,加入适当保护剂后冻干的干粉疫苗与常规液体疫苗相比,具有相同或相似的红细胞凝集价、动物保护率、免疫产生期和淋巴细胞转化率,从而初步建立了RHD灭活干粉疫苗的生产方法,选择合适的冻干保护剂是RHD灭活疫苗干粉化的关键。 (2)对兔A型魏氏梭菌灭活干粉菌苗的研制首先是采用硫酸铵盐析沉淀法浓缩粗提灭活菌液,然后通过冷冻真空干燥制得冻干粉。动物免疫试验结果表明,A型魏氏梭菌灭活疫苗冻干粉与同样剂量的A型魏氏梭菌灭活疫苗免疫保护效力相当,2ml剂量时的平均免疫保护率为75%,3ml时为88.2%,免疫产生期为14天,初步建立起了兔A型魏氏梭菌灭活干粉菌苗的生产方法。 (3)通过Kaerber法测定α毒素对小鼠的半数致死量后,确定对应于10LD50毒力标准的毒素所能引起水解反应的稀释度,从而建立起A型魏氏梭菌毒力测定试验的替代试验方法。该方法比原试验方法操作更简单,取材经济,并能对毒素毒力进行定量计算。 (4)以卵磷脂水解试验为基础,根据α毒素在被抗毒素完全中和后将出现水解抑制这一原理,并通过与常规的小鼠毒素中和试验测定方法进行比较,建立起了测定家兔血清抗α毒素水平的卵磷脂水解抑制试验方法。该方法可用于测定不同血清样品的抗α毒素水平,其敏感性和精确性优于小鼠毒素中和试验,且操作简单,取材经济,易于推广应用。