糖蛋白是指由寡糖与多肽链共价连接而成的一类结合蛋白质。研究表明,糖蛋白具有调节免疫、抑制肿瘤、降低血糖、血酯、抗氧化、防衰老等作用,在新型特种药物及功能性食品开发方面具有广阔的运用前景。本文主要研究了山药糖蛋白的超声辅助提取、纯化及其免疫调节功能,主要结论总结如下: 1.采用超声辅助提取山药糖蛋白,主要考察了全程超声辅助提取时间、超声作用时间、超声间隙时间、超声功率、提取温度、电机搅拌转速、料液比七个单因素对山药糖蛋白得率的影响。 2.在单因素试验的基础上,选择全程超声辅助提取时间、超声功率、提取温度、料液比4个因素进行了正交试验,并进行了极差分析和方差分析,结果如下: ① 最佳提取条件为全程超声辅助提取时间为40min、超声功率为1400W、提取温度40℃、料液比20g/L。 ② 影响山药糖蛋白得率的主要因素是料液比,其次是全程超声辅助提取时间、超声功率,其中料液比对得率的影响特别显著,全程超声辅助提取时间对得率的影响显著。 ③ 验证了最佳提取条件,结果表明在该条件下提取,糖蛋白得率的平均值为6.847%。 3.对山药糖蛋白用DEAE-52纤维素及SephadexG-75柱层析纯化,得到了一种中性糖蛋白组分GLP-Ⅰ’及一种酸性糖蛋白组分GLP-Ⅱ’;用薄层层析对这两种糖蛋白组分的纯度进行鉴定,结果表明GLP-Ⅰ’及GLP-Ⅱ’的纯度较高;用SephadexG-75柱层析测定了GLP-Ⅰ’及GLP-Ⅱ’的分子量,其分子量分别为89,381Da、47,412Da;薄层层析法测定了GLP-Ⅰ’的单糖组成,结果表明GLP-Ⅰ’的单糖组成主要有:L-半乳糖、D-葡萄糖、D-甘露糖;对GLP-Ⅰ’进行了红外光谱扫描,其特征吸收峰再次表明该组分为一种糖蛋白。 4.通过碳廓清试验及测定血清溶血素的方法,考察山药糖蛋白对小鼠免疫功能的影响。结果表明,低、高剂量组和对照组之间,小鼠胸腺器官及吞噬指数两项功能检测均为阳性。根据卫生部发布的《保健食品功能学评价程序和检验方法》的结果判定原则,认为山药糖蛋白具有一定的免疫调节功能。