神经细胞黏附分子（Neural cell adhesion molecule,NCAM）作为一种跨膜蛋白,在细胞间连接、神经系统发育、突触形成等生物学过程中发挥重要功能。唾液酸（Sialic acids,Sias）是一系列含有9个碳原子的羟基化单糖酰化衍生物,通常位于糖蛋白或糖鞘脂的糖链末端,在多种肿瘤细胞中都存在Sias的异常表达。在多聚唾液酸转移酶的催化作用下,Sias可以被添加到NCAM上的N-糖链末端,形成由α-2,8键连接的多聚唾液酸链。被多聚唾液酸（Polysialic acid,PSA）修饰的NCAM称为PSA-NCAM。NCAM与PSA-NCAM在哺乳动物成体中表达量低,但在胰腺癌、肺癌等肿瘤中表达异常增加,继而影响细胞的侵袭和迁移能力。因此,研究NCAM与PSA-NCAM在肿瘤中的生物学功能有利于了解癌症的发生发展机制,为肿瘤的诊疗提供理论基础。本课题以人源的正常乳腺上皮组织和乳腺癌组织以及小鼠正常乳腺上皮细胞NMu MG为研究对象。在正常乳腺上皮组织和乳腺癌组织中,比较NCAM和PSA-NCAM的表达;并在小鼠正常乳腺上皮细胞NMu MG中过表达NCAM或多聚唾液酸转移酶ST8Sia II（STX）,观察细胞相关表型的变化,初步探索NCAM和PSA-NCAM对乳腺癌发生发展的影响。本文以乳腺癌临床样本进行检测,结合TCGA数据库分析,发现NCAM在乳腺癌组织中的表达高于正常乳腺上皮组织,且NCAM的高表达不利于患者的生存期;当在NMu MG细胞过表达NCAM或STX后,细胞的侵袭和迁移能力增加,细胞凋亡数量增加,增殖能力减弱;利用免疫共沉淀联用质谱蛋白质组学技术分析发现,NCAM过表达与多聚唾液酸糖基化修饰水平提高后,NMu MG细胞中与NCAM相互作用的异常表达蛋白可能是“铰链”蛋白,通过“铰链”的变化影响细胞的转录翻译、侵袭迁移等生物学过程;此外,本文试图使用Ac4Man NAz标记多聚唾液酸,实现对多聚唾液酸的定性和定量的分析以及功能研究,实验结果证实Ac4Man NAz可以标记唾液酸,而不能用来标记多聚唾液酸。综上,本文通过对对照组、过表达NCAM或STX的实验组细胞进行研究,探索NCAM与STX对NMu MG表型的影响及NCAM上PSA的修饰对NCAM或PSA-NCAM参与的信号通路的影响。初步探索了NCAM和PSA-NCAM在乳腺癌发展过程中的生物学功能,以及尝试使用非天然糖来标记多聚唾液酸,以实现对多聚唾液酸的分析和研究。