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目的：甲状腺细胞病理学Bethesda报告系统（TBSRTC）对Ⅲ、Ⅳ级结节的恶性风险评估存在争议，本文主要目的是通过检测MicroRNA-146b、-221、-222在甲状腺良恶性结节细针穿刺细胞液中的表达情况，回顾性分析其差异表达是否有助于TBSRTC对Ⅲ、Ⅳ级结节进行准确的判读，以协助甲状腺细针穿刺细胞学检查（FNAC）作出更准确的诊断。 方法：收集2014年1月至2015年12月于我院行超声引导下细针穿刺细胞学检查（US-FNAC）并随访到术后病理结果的甲状腺肿瘤病例共51例，56个结节。对56个结节的部分细针穿刺细胞液进行MicroRNA的提取定量，分析MicroRNA在甲状腺良恶性结节中的表达情况，根据其差异表达对Ⅲ、Ⅳ级结节进行升级或降级处理后评估FNAC对甲状腺结节定性诊断的价值。 结果：经FNAC的56个结节，术后病理诊断为甲状腺恶性结节41个，甲状腺良性病变15个；恶性结节MicroRNA-146b、-222、-221的表达高于良性结节，具有统计学差异（P<0.05）。根据MicroRNA的差异表达，将4个高表达的Ⅲ级结节归为可疑恶性组（Ⅴ/Ⅵ级），呈低表达的2个Ⅲ级、2个Ⅳ级结节归为良性组（Ⅱ级），统计出FNAC的灵敏度、特异度、准确率阳性预测值、阴性预测值分别为97.6％、93.3%、96.4%、97.6%、93.3%。 结论：MicroRNA-146b、-222、-221在甲状腺恶性结节的表达高于良性结节，其差异表达有助于TBSRTC对Ⅲ、Ⅳ级结节进行准确判读，可协助FNAC作出更准确的诊断；MicroRNA作为甲状腺恶性肿瘤的特征性表达分子、FNAC诊断的辅助措施，MicroRNA有其潜能。