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背景:糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy,DN）已成为慢性肾脏病及终末期肾病的首要原因,以蛋白尿为主要特征,伴随肾小球滤过率的进行性下降,但至今仍缺乏对DN发生发展机制的了解及有效的治疗手段。白介素33（Interlukin-33,IL-33）是白介素1家族中的一员,在组织损伤后由内皮细胞等释放进一步激活固有免疫系统,是一种炎症损伤的预警因子,同时其下游调控固有淋巴细胞2型（Type 2 Innate Lymphoid Cells,ILC2s）等多种固有免疫组分,且在肺、肝脏等器官中显示出了与纤维化的密切关系。炎症贯穿DN病程的始终,而肾小球硬化及间质纤维化则是与DN患者肾脏结局密切相关的因素,现尚缺乏DN等慢性肾脏病中IL-33的机制探究,结合它与炎症及纤维化的调控关系,我们假设IL-33在DN中具有介导炎症加重及纤维化的致病作用。方法:1)回顾纳入于北京协和医院肾穿刺活检诊断糖尿病肾病患者21例作为疾病组,纳入IgAN 5例,膜性肾病5例作为疾病对照组,收集尿液及肾脏标本;纳入孤立性肾癌根治术者6例,采集癌旁肾组织作为正常肾组织;纳入性别年龄匹配的健康对照者5例,收集晨尿。利用酶联免疫吸附试验测定外周IL-33水平、免疫组化半定量评估肾脏内源性IL-33情况,观察DN患者、其他慢性肾脏疾病患者及正常对照者间IL-33差异,评估DN疾病状态中肾脏内源性IL-33的表达变化。2)应用不同周龄的db/db及db/m小鼠（分为db/db疾病组及db/m对照组）、使用酶联免疫吸附试验、免疫组化半定量及免疫印迹技术共同评估不同病程阶段肾脏组织及尿液IL-33情况,进一步评估DN动物模型中内源性IL-33的表达水平及其与病程的关系;3)应用IL-33敲除小鼠STZ联合单侧肾切除模型（分为IL-33敲除C57B1/6J小鼠+STZ+单侧肾切除组（IL-33KO+STZ+Unx组）、野生型C57B1/6J小鼠+STZ+单侧肾切除组（WT+STZ+Unx组）及IL-33敲除C57B1/6J小鼠+柠檬酸钠+假手术组（对照组））进行IL-33调控作用的探究,通过肾脏特殊染色（MASSON染色、PAS染色、H&E染色）及小鼠肌酐、尿蛋白、血糖等生化指标评估IL-33敲除对于DN肾脏表型影响。4)为进一步进行机制探究,重点关注IL-33 下游ILC2 通路调控情况及其与纤维化的关系,基于免疫荧光及流式细胞术评估db/db小鼠及糖尿病肾病患者肾脏局部ILC2水平及在疾病模式下内源性IL33表达形式。结果:1)通过人类标本从患者层面验证,IL-33在糖尿病肾病组肾脏组织及尿液中均较正常肾组织明显表达升高,IL-33在糖尿病肾病组肾脏组织较正常肾组织明显表达升高（P<0.0001）,且表达水平与肾脏纤维化程度呈正相关（Spearman’sρ=0.072,P=0.007）,与具体疾病分型、球性硬化程度、炎症细胞浸润程度、蛋白尿水平及肾功能损伤程度均无明显关系。IL-33在DN病例中较正常组织明显表达增多,但IgAN病例中与糖尿病肾病组有相似升高,说明IL-33肾脏局部表达升高可能不具疾病特异性,其升高可能与疾病诱发的纤维化过程相关。此外血清中未观察到IL-33在疾病组及健康对照组间的差异（P=0.407）,但在尿液中可见糖尿病肾病组患者IL-33/Cr水平升高（P=0.017）。2)在糖尿病肾病早期动物模型中发现IL-33在DN早期出现,早于病理损伤出现,可能为预警因子,其程度随病程增加而增加。在16周龄db/db早期糖尿病小鼠动物模型中,即有IL-33在肾脏局部较对照组db/m小鼠升高（P=0.011）,这种升高早于肾功能损害及肾脏病理改变出现,39周龄db/db小鼠较24周龄db/db小鼠IL-33肾脏局部水平进一步升高（P=0.04）。同时db/db组尿液中IL-33 水平较对照组增高（P=0.030）,且39周龄db/db小鼠较24周龄db/db小鼠尿液IL-33水平有升高趋势,但尚无统计学差异（P=0.335）。3)在IL-33KO小鼠DN后期模型中,验证发现IL-33具有致病作用。STZ诱导糖尿病联合单侧肾切除的IL-33敲除的小鼠模型中,疾病模型组均可见间质纤维化、炎症细胞浸润及系膜增生等病理改变,提示DN疾病后期模型建模成功。其中,32周龄IL-33KO+STZ+Unx组较WT+STZ+Unx组高血糖水平减低（P<0.001）,尿白蛋白/肌酐水平减低（P=0.021）,整体生存延长的趋势,但尚无统计学差异（P=0.060）。同时特殊染色可见IL-33KO+STZ+Unx组较WT+STZ+Unx组肾脏纤维化、炎症细胞浸润及肾小球系膜增生均减轻。4)通过人类肾脏组织免疫荧光共染提示IL-33在疾病情况下可由成纤维细胞主要分泌,提示其与纤维化相关。人类肾脏IL-33免疫组化染色提示IL-33阳性细胞在糖尿病肾病患者及IgAN患者中与正常肾组织中表达模式具有明显区别,前者主要表达于间质炎性细胞浸润及纤维化部分,后者主要在毛细血管袢内皮细胞及大血管内皮细胞表达,进一步进行免疫荧光染色,提示疾病状态下由主要为成纤维细胞表达IL-33。5)通过流式细胞术定量,显示ILC2在db/db小鼠肾脏局部含量极低,占肾脏淋巴细胞比例约0.26-0.39%,且在不同周龄db/db组ILC2比例均低于db/m 比例（39周龄:P=0.015）,免疫荧光染色未能在糖尿病肾病患者及正常肾组织中定位ILC2细胞。结论:IL-33参与了糖尿病肾病疾病的全程,在早期即可见到IL-33肾脏局部及尿液的增多,且升高早于肾功能损害及肾脏病理改变出现,提示其可能存在作为预警因子的作用。随着病程进展,IL-33表达增多,敲除IL-33可使疾病表型得到一定好转,疾病状态下肾脏病变局部的内源性IL-33主要为成纤维细胞而非内皮细胞分泌,支持IL-33可能通过介导纤维化参与加重糖尿病肾病这一论点,提示IL-33可作为后续糖尿病肾病探究及治疗的潜在靶点。背景:肾脏是单克隆免疫球蛋白沉积病（MIDD）中受累最多的器官,如不经治疗最终可发展为终末期肾病,直接影响患者生活质量及生存情况。但回顾现有研究,少有研究对肾脏病理中不可逆的慢性损伤成分与临床表现及其预后之间的关系进行评估分析。方法:回顾性纳入2001年1月至2018年12月期间于北京协和医院经肾穿刺活检诊断的单克隆球蛋白沉积病（Monoclonal Immunoglobulin Deposition Disease,MIDD）20例及肾轻链淀粉样变性（Light-chain Amyloidosis,AL）患者20例。对肾脏病理中肾小球硬化、肾小管萎缩/间质纤维化、动脉硬化等慢性病变成分分别进行半定量评分,并根据2017年提出的肾脏慢性病变分级体系对整体慢性病变进行分级评估。探究同为罕见结节硬化性肾小球病,MIDD与AL患者间临床表现及病理改变的异同,同时评价MIDD中肾脏不可逆的慢性病变与临床表现之间的关系,以及它们与ESRD进展风险的相关性。结果:与AL患者相比,MIDD患者表现出更为严重的肾功能不全（血清肌酐:193.0（117.3-356.25）vs.81.5（68.5-140.29）,P<0.001）,但低白蛋白血症较 AL 患者轻（MIDD vs.AL,33.0±6.4vs.24.9±7.6,P=0.001）。肾脏病理方面,不同于 AL 患者多表现为经典的结节硬化,MIDD患者缺血相关损伤更明显,表现为全肾小球硬化,间质纤维化倾向更为严重。同时,与AL相比,在MIDD中总体慢性损伤程度明显升高,且与肾小球滤过率独立相关（β系数（95%置信区间）:-4.618（-8.238-0.999）,P=0.017）。此外,MIDD诊断时重度间质纤维化（病变占皮质比例>75%）为患者进展为为ESRD的危险因素。结论:MIDD基线肾脏病理中总体慢性病变程度及重度间质纤维化与临床及预后密切相关。在MIDD的诊疗过程中,临床应重视MIDD慢性病变的分级评估,可能有助于指导后续治疗及评估肾脏结局。