目的:KNSTRN（Kinetochore-Localized Astrin-Binding Protein）是有丝分裂后期位于动粒上与Astrin结合的一种蛋白,与细胞分裂密切相关。目前关于KNSTRN在肿瘤方面的研究主要集中在皮肤癌,据报道皮肤癌中经常发生KNSTRN基因点突变和拷贝数的变异。但国内国外极少有文献报道KNSTRN在癌和正常组织中的表达差异。本文旨在通过生物信息学探索KNSTRN在非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）及癌旁组织中的表达差异以及KNSTRN表达水平与患者预后以及临床分期的关系,并进一步在细胞、动物和组织层面探讨KNSTRN对NSCLC的影响及其机制。方法:1.通过在线数据库分析KNSTRN在非小细胞肺癌及癌旁组织中的表达差异和KNSTRN表达量与肺腺癌和肺鳞癌患者临床分期以及临床预后结局的关系。2.实时荧光定量PCR检测正常Ⅱ型肺泡上皮细胞（BEAS）和多种肺腺癌细胞KNSTRN表达量,选取表达量较高的两种肺腺癌细胞干扰沉默KNSTRN的表达。3.MTT法、平板克隆法、细胞免疫荧光Ki67染色检测下调KNSTRN表达后对H1299和H1975细胞增殖的影响。4.流式细胞技术检测下调KNSTRN表达后对H1299和H1975细胞周期的分布情况,以及运用Western Blot技术检测周期相关蛋白的变化。5.流式细胞技术检测下调KNSTRN表达后对H1299和H1975细胞凋亡的影响情况,以及运用Western Blot技术检测凋亡相关蛋白的变化。6.小室迁移和侵袭实验检测下调KNSTRN表达后对H1299和H1975细胞迁移和侵袭能力的影响,以及运用Western Blot技术检测EMT相关蛋白的变化。7.利用R语言对肺腺癌芯片进行GSEA富集分析,并运用Western Blot技术验证。8.建立裸鼠肺腺癌细胞皮下荷瘤模型观察持续下调KNSTRN表达对荷瘤瘤体的影响。9.通过免疫组织化学法检测肺腺癌组织芯片癌组织和癌旁组织KNSTRN表达差异以及通过SPSS分析KNSTRN表达量与患者预后关系。结果:1.通过几种数据库分析发现:相比较于正常肺组织,在肺腺癌和肺鳞癌中KNSTRN均高表达;临床分期越晚的肺腺癌患者中KNSTRN表达量越高,高表达KNSTRN肺腺癌患者的中位生存期明显低于低表达KNSTRN肺腺癌患者;肺鳞癌患者临床分期与KNSTRN表达量无相关性,KNSTRN表达量高低不影响肺鳞癌患者预后。2.实时荧光定量PCR检测结果显示相比于正常Ⅱ型肺泡上皮,多种肺腺癌细胞KNSTRN表达量升高,选取表达量较高的H1299和H1975进行后续实验。3.MTT、平板克隆、细胞免疫荧光Ki67染色结果显示干扰沉默KNSTRN后可抑制肺腺癌细胞增殖。4.干扰沉默KNSTRN可通过上调P21和P27细胞周期负性调控因子的表达,下调CyclinD1、CyclinE1、CDK2、CDK4、CDK6蛋白表达,肺腺癌细胞周期不同程度的阻滞在G0/G1期。5.干扰沉默KNSTRN可以使促凋亡蛋白BAX表达增多,抗凋亡蛋白BCL2表达减少,cleaved-caspase3增多,肺腺癌细胞凋亡增多。6.干扰沉默KNSTRN可下调间质标记蛋白N-cadherin、vimentin表达,减少MMP2、MMP9分泌,抑制肺腺癌细胞的迁移和侵袭能力。7.通过基因富集分析发现在非小细胞肺癌标本中KNSTRN在MYC信号转导通路富集表达,干扰沉默KNSTRN可抑制GSK3β-β-catenin-cmyc通路和EGFR-STAT1/STAT3 通路的活性。8.体内实验结果显示持续下调KNSTRN的表达可显著抑制肺腺癌细胞H1975裸鼠体内成瘤,抑制EGFR-STAT1/STAT3通路的活性。9.肺腺癌组织芯片结果显示癌组织KNSTRN表达量高于癌旁组织,且KNSTRN的表达量与患者预后负相关。结论:综上所述,KNSTRN高表达于非小细胞肺癌并与肺腺癌患者不良预后和临床分期呈正相关。KNSTRN可能是通过激活GSK3β-β-catenin-cmyc通路和EGFR-STAT1/STAT3通路促进肺腺癌细胞的恶性生物学行为。