【摘 要】
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目的:肺炎克雷伯菌是常寄居在健康人体的由酸性脂多糖组成厚荚膜的革兰阴性条件致病肠杆菌科细菌,可引起宿主身体多个部位的感染,在下呼吸道细菌感染的病原菌检测中检出率颇高。抗生素在治疗致病菌感染中占有举足轻重的地位。由于抗菌药的频繁使用,全世界范围内耐药菌的检出率与日俱增。研究致病菌的临床特征、致病菌对抗生素的耐药率、致病菌的耐药机制及研究新作用靶点的抗生素对临床致病菌感染的治疗、预防耐药菌的出现至关重
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目的:肺炎克雷伯菌是常寄居在健康人体的由酸性脂多糖组成厚荚膜的革兰阴性条件致病肠杆菌科细菌,可引起宿主身体多个部位的感染,在下呼吸道细菌感染的病原菌检测中检出率颇高。抗生素在治疗致病菌感染中占有举足轻重的地位。由于抗菌药的频繁使用,全世界范围内耐药菌的检出率与日俱增。研究致病菌的临床特征、致病菌对抗生素的耐药率、致病菌的耐药机制及研究新作用靶点的抗生素对临床致病菌感染的治疗、预防耐药菌的出现至关重要。本研究的主要目的是分析本院碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的特征,了解我院CRKP对头孢他啶-阿维巴坦(Ceftazidime-avibactam,CZA)耐药的情况及携带耐药基因情况,并对其进行同源性分析,判断我院CRKP耐CZA流行的优势克隆株,为我院CRKP感染及耐药菌的临床用药提供理论依据。方法:收集2017年1月至2019年6月我院细菌室分离的肺炎克雷伯菌,通过法国梅里埃公司VITEK2-compact分析仪鉴定细菌及药敏分析,选取耐碳氢酶烯肺炎克雷伯菌121株。对这121株同时应用微量肉汤稀释法测定CZA的最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)。筛选出耐CZA的CRKP菌株应用荧光定量PCR(q PCR)及琼脂糖凝胶电泳对耐药基因(NDM、VIM、IMP、GIM、SPM、TMB、SMB、SIM、AIM、DIM)进行初筛及确证,扩增产物送尚博公司双向测序,测序结果与Blast网上比对确定其基因型,通过多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)分析细菌同源性。对耐CZA的CRKP进一步应用微量肉汤稀释法测定替加环素(Tigecycline,TGC)的MIC值,了解CZA耐药CRKP对TGC的药敏情况。结果:121株CRKP应用微量肉汤稀释法测定CZA的MIC值,获得23株CZA耐药的CRKP,耐药率占19.01%,余98株对CZA敏感,占80.99%,提示我院CRKP对CZA仍保持高度的敏感性。23株CZA耐药的CRKP应用微量肉汤稀释法测定替加环素的MIC值,获得1株耐TGC的CRKP,占4.35%,8株对替加环素中介,占34.78%,余14株对替加环素敏感,占60.87%,提示我院耐CZA的CRKP对替加环素仍保持高度的敏感性。23株CZA耐药的CRKP PCR检出耐药基因NDM-1 11株(47.83%),NDM-5 4株(17.39%),8株均未检测到耐药基因(NDM、VIM、IMP、GIM、SPM、TMB、SMB、SIM、AIM、DIM),且无携带两种耐药基因的菌株。23株CZA耐药的CRKP菌株MLST分型结果:ST11型13株(56.52%),ST147型3株(13.04%),ST859型2株(8.70%),ST2123型、ST273型、ST3520型、ST3449型、ST15型各1株。结论:本院CRKP对CZA具有较高的敏感率,但仍存在一定的CZA耐药情况,耐CZA的CRKP大部分对TGC敏感,TGC可作为耐CZA的CRKP治疗的可选择药物。ST11型是我院范围内耐CZA的CRKP的主要菌株类型,与当前国内主要流行序列型相同。携带NDM-1、NDM-5基因是导致我院CRKP耐CZA的重要因素。
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