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研究背景肺癌是目前全球发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一,五年生存率仅为8.9%～15%。在中国,每年约有六十万人死于肺癌。肺癌在组织学上分为:非小细胞肺癌(Non–small cell lung cancer,NSCLC)和小细胞肺癌(Small cell lung cancer,SCLC),其中NSCLC约占85%。肺癌的发生发展是一个多因素影响的过程,环境和遗传在其中扮演了重要的角色。随着蛋白质组学的进步,众多影响肺癌发生发展的蛋白吸引了人们的眼球,亲环蛋白A(Cyclophilin A,CypA)就是其中之一。亲环蛋白是一组具有肽基脯氨酰顺反异构酶( Peptidyl—prolyl cis-trans isomeras,PPIase)活性的蛋白质家族。CypA是亲环蛋白家族中最重要的一员,参与催化细胞内蛋白质的折叠、装配和运输。CypA已被证明在多种癌症的发生发展中起到了重要的作用,在肺癌中的作用和机制却不甚明了。本课题旨在应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术研究CypA表达对NSCLC细胞生长和转移能力的影响及其相关的作用机制。材料和方法应用Real-time PCR方法检测多株肺癌细胞和正常人胚肺成纤维细胞系中CypA的表达差异。利用慢病毒介导的CypA siRNA干扰NSCLC细胞系95C和A549细胞中CypA的表达,通过细胞增殖实验,单克隆集落形成实验和软琼脂集落形成实验评价CypA表达对NSCLC细胞生长的影响,应用过河实验,Transwell小室观察CypA对细胞迁移和侵袭力的影响,并通过明胶酶谱法分析CypA对NSCLC细胞分泌基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinase,MMP)2和MMP9活性的影响。结果在各株肺癌细胞系中CypA mRNA表达量明显高于人胚肺成纤维细胞系。应用以CypA为特异靶点的RNAi干扰95C和A549细胞可以在mRNA和蛋白水平上明显地抑制CypA的表达。CypA表达下降后95C和A549细胞的增殖,逃避密度依赖性生长抑制和成瘤都受到了明显抑制。更重要的是我们首次观察到CypA表达下降后95C和A549细胞的迁移和侵袭能力明显下降,并且发现CypA的表达量与癌细胞分泌MMP9的活性正相关,而与MMP2的活性没有这种相关性。结论CypA在多株肺癌细胞系中都呈高表达。CypA在NSCLC细胞中可以通过影响细胞增殖,密度依赖性生长抑制和成瘤性等途径促进NSCLC细胞生长;可以通过影响细胞迁移,侵袭能力和细胞分泌MMP9的活性促进NSCLC细胞转移。