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研究背景多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄期女性最常见的内分泌紊乱性疾病之一,以卵巢多囊样改变、排卵障碍、高雄激素体征或高雄激素血症为特征。PCOS卵泡发育异常主要表现为:1.早期卵泡过多募集;2.卵泡选择过程中发育停滞。该过程与卵泡微环境变化、卵巢颗粒细胞(Granulosa Cells)功能紊乱、AMH(Anti-Mullerian Hormone)/AMHR(Anti-Mullerian Hormone Receptor)对早期卵泡发育抑制作用增强有关。N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是真核细胞中最普遍的RNA修饰,在甲基转移酶、去甲基化酶、结合蛋白的动态调控下参与生殖细胞生长发育过程的调控。卵巢颗粒细胞作为决定卵泡命运、调节卵母细胞发育成熟的重要成员,其m6A的动态调控网络及意义尚未明晰。FTO是m6A去甲基化酶之一,与肥胖、2型糖尿病密切相关;而PCOS患者常伴发脂质代谢异常、糖耐量异常。因此,探索卵巢颗粒细胞中m6A的动态调控机制,研究其与PCOS临床特征及妊娠结局的相关性,可从表观遗传学角度为PCOS的临床诊治提供新思路。研究目的1.明确PCOS颗粒细胞中FTO的表达模式及其对m6A的调控作用;2.探索颗粒细胞中FTO表达与PCOS排卵障碍、内分泌紊乱的关系;3.阐明颗粒细胞中FTO表达与体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系。材料与方法纳入BMI<24kg/m2及BMI≥24kg/m2的正常排卵及PCOS患者共62例,收集其接受经阴道超声引导下穿刺取卵过程中的卵泡液,提取颗粒细胞,检测m6A甲基转移酶METTL 3、METTL 14,去甲基化酶FTO、ALKBH5,结合蛋白YTHDF1、YTHDF2及总m6A水平。收集入组患者行控制性超排卵前基线内分泌资料,检测颗粒细胞中AMHRⅡ的表达,分析颗粒细胞FTO表达与上述指标的相关性及预测价值。随访入组患者行体外受精-胚胎移植的妊娠结局,分析颗粒细胞FTO表达与其相关性及预测价值。结果1.在正常体重及超重组中,PCOS颗粒细胞FTO表达均高于对照组(P<0.05),总m6A水平低于对照组(正常体重:0.097±0.028 vs 0.104±0.029;超重:0.081±0.017 vs 0.093±0.03);2.FTO在月经稀发患者颗粒细胞中显著高表达(P<0.001);颗粒细胞FTO表达水平与血清AMH、LH水平呈正相关(AMH:r=0.213,p=0.049;LH:r=0.275,P=0.015);ROC 曲线显示颗粒细胞 FTO mRNA 对 PCOS 有较好的预测价值(AUC=0.85);Logistic回归分析表明FTO是PCOS发病的独立危险因素(OR 值:1.06,95%CI:1.02-1.11)3.在正常体重及超重组中,PCOS颗粒细胞AMHRⅡ表达均上调,且与FTO mRNA表达水平呈正相关(r=0.545,P=0.002)。4.颗粒细胞FTO表达水平与MⅡ卵率、正常受精率呈正相关(MⅡ卵率:r=0.242,P=0.029;正常受精率:r=0.213,P=0.048),但妊娠与移植未妊娠患者颗粒细胞中FTO表达水平无显著差异(P>0.05),且FTO与临床妊娠的Logistic回归模型无统计学意义(P>0.05).结论1.多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞中FTO高表达,总m6A水平下降,且独立于体重的影响;2.卵巢颗粒细胞中FTO表达与血清AMH、LH水平及AMHRⅡ表达正相关,对排卵障碍有一定预测价值,是PCOS发病的独立危险因素;3.卵巢颗粒细胞中FTO表达水平对妊娠结局的预测价值较局限,有待更大样本的研究进一步挖掘。