【摘 要】
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目的:通过脂质体转染GRP78反义寡核苷酸使SMMC-7721细胞GRP78mRNA降低,以研究GRP78对SMMC-7721细胞Topo-Ⅱ表达及耐药性的影响,以加深对肝癌耐药性的认识,为肿瘤化疗提供新的
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目的:通过脂质体转染GRP78反义寡核苷酸使SMMC-7721细胞GRP78mRNA降低,以研究GRP78对SMMC-7721细胞Topo-Ⅱ表达及耐药性的影响,以加深对肝癌耐药性的认识,为肿瘤化疗提供新的思路。方法:一、用低浓度顺铂(cDDP)短期诱导SMMC-7721细胞产生耐药,并用脂质体转染不同浓度GRP78反义寡核苷酸(GRP78ASODN)以降低SMMC-7721细胞GRP78的表达,应用RT-PCR检测并筛选一个最有效的降低GRP78mRNA表达的GRP78ASODN浓度。二、用MTT法检测亲本SMMC-7721细胞、耐药细胞及筛选出的转染组细胞对cDDP的药物敏感性,得出各组的半数抑制浓度(IC50)及耐药指数。三、RT-PCR检测三组细胞Topo-ⅡmRNA的表达。结果:一、RT-PCR显示转染GRP78ASODN浓度为100nmol/ml时,GRP78mRNA降低最为显著(P<0.01)。二、经诱导得到的耐药细胞,IC50是亲本细胞IC50的1.91倍,耐药性明显升高(P<0.01),耐药细胞经转染后,其IC50与转染前相比其耐药性显著降低(P<0.01)。三、耐药组Topo-ⅡmRNA的表达较亲本细胞相显著降低(P<0.01),转染组与耐药组相比显著升高(P<0.01)。结论:用低浓度cDDP短期诱导SMMC-7721细胞产生耐药;GRP78能提高SMMC-7721细胞的耐药性,这与下调Topo-Ⅱ表达有关;抑制GRP78可以降低SMMC-7721细胞的耐药性。
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