Jagged 1和表皮生长因子促进小鼠毛发生长的研究

来源 :佛山科学技术学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wadfgh1234
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毛囊是哺乳动物的皮肤附属器官,是维持皮肤稳态的重要组成部分。对动物而言,毛囊的衍生物是被毛,具有御寒、防御、保护、传递等的重要作用,也是重要的畜产品之一;对人类而言,头发影响着众多人的身心健康,具有重要的社会意义。近年来,世界脱发的人口增多,我国脱发人群逐年增多且趋于年轻化,因此,治疗脱发的研究一直得到国内外研究人员的关注。Jagged 1作为Notch受体的主要配体之一,广泛表达于多种组织,参与各组织的发育生长。有研究表明调节性T细胞(Regulating T cells,T-regs)可通过高表达Jagged 1来刺激毛囊干细胞(Hair follicle stem cells,HFSC)的增殖和分化,从而促进毛囊的再生。表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)是一种重要的生长因子,在成熟的毛囊外根鞘上,可检测到大量EGF和EGF受体的存在,说明EGF参与毛囊的生长发育与周期。为了探究Jagged 1和EGF对体外毛囊毛干生长和脱发小鼠模型的影响,本试验做了以下研究:(1)Jagged 1和EGF促进雄激素性抑制的体外毛囊毛干生长试验使用8周龄雄性C57BL/6小鼠,从小鼠触须垫中分离出完整毛囊并培养。探索睾酮素(Testosterone,Testo)对体外毛囊生长发育的有效抑制浓度,Jagged1和EGF能否促进受Testo抑制生长的毛囊发育。结果表明当Testo的浓度为20μg/m L以上时,Testo显著抑制体外毛囊毛干生长(P<0.05);添加40μg/m L Jagged 1或/和1ng/m L EGF后,毛囊毛干加快生长,毛干生长长度显著高于Testo组(P<0.05)。结果提示Jagged 1和EGF可能作为一种生长因子促进体外毛囊生长。(2)Jagged 1和EGF对雄激素性脱发小鼠毛发生长的影响试验使用50只8周龄雄性C57BL/6小鼠作为动物模型,小鼠背部脱去2cm×2cm区域的毛发,分成对照组、Testo组、Testo+Jagged 1组、Testo+EGF组和Testo+Jagged 1+EGF组,除对照组外,其余组先在脱毛区域涂100μL0.5%Testo,抑制背部毛囊的生长,1h后,三个处理组分别再涂抹100μL的1mg/m L Jagged 1、30μg/m L EGF和1mg/m L Jagged 1+30μg/m L EGF,每天涂抹一次,连续涂抹14天并观察,第0、7、14天对小鼠背部拍照记录。第7、14天采集各组小鼠皮肤组织,并对组织进行石蜡包埋切片,HE染色、免疫组织化学,TUNEL分析;检测组织中毛囊细胞增殖和分化相关的Notch 1、Notch 2、成纤维细胞生长因子7(Fibroblast growth factor,FGF 7)、音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、β-catenin、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)和诱导性协同刺激分子(Inducible co-stimulator,Icos)基因的m RNA相对表达量。结果表明,Jagged 1或/和EGF能促进受Testo抑制毛囊生长的毛发生长,且Jagged 1+EGF组效果最好;组织学与免疫学实验结果显示Jagged 1组和Jagged 1+EGF组的毛囊数显著多于Testo组(P<0.05),Jagged 1+EGF组的皮下组织厚度显著高于Testo组(P<0.05),在第7天,Jagged 1+EGF组的小鼠皮肤表达Ki67显著高于Testo组(P<0.05);在第14天,3个处理组毛囊细胞凋亡情况与Testo组相比,有下降趋势但无显著性(P>0.05)。RT-q PCR试验结果显示,在第7天时,Jagged 1组的Icos基因表达显著升高(P<0.05),Jagged 1+EGF组的VEGF、TNF-α表达显著升高(P<0.05),各组间Shh、FGF 7和β-catenin的表达无明显变化,在第14天,Testo促进了Notch1和Notch 2、Shh、FGF 7、TNF-α、Icos的表达升高(P<0.05)。以上结果提示Jagged1和EGF可促进小鼠背部毛发生长,可能是通过刺激细胞增殖和调控参与毛囊生长和分化的一系列基因的表达来实现的。本研究表明了生长因子Jagged 1和EGF可促进小鼠毛发生长,为研究动物毛发生长提供试验基础,为治疗雄性激素脱发的药物研发提供新选择。
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