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第一部分CD40在溃疡性结肠炎组织中的表达及意义目的:研究CD40分子在溃疡性结肠炎组织中的表达,及其与溃疡性结肠炎严重度之间的相关性。方法:应用免疫组化技术检测56例溃疡性结肠炎组织和10例正常组织中CD40分子表达。结果:CD40分子在溃疡性结肠炎组织中的阳性表达率为62.5%,明显高于对照组(P<0.05)。与轻度溃疡性结肠炎相比,CD40阳性表达率在中度溃疡性结肠炎中明显升高(P<0.05)。结论:溃疡性结肠炎患者结肠组织中CD40表达异常。第二部分抗CD40单克隆抗体在溃疡性结肠炎中治疗效应及作用机制的实验研究目的初步探讨抗CD40单克隆抗体在葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)中的治疗效应及作用机制。方法24只BALB/c小鼠按随机数字表分为:A组(对照组,n=6)、B组(模型组,n=6)、C组(奥沙拉秦干预组,n=6)、D组(抗CD40单克隆抗体干预组,n=6)。A组小鼠自由饮用蒸馏水7天;B、C、D组小鼠自由饮用5%DSS溶液7天以制成UC小鼠模型;造模的同时于第1、3、5及7天分别给以A、B组腹腔注射无菌蒸馏水。C组小鼠每天灌服奥沙拉秦(60mg/kg)、D组小鼠于造模第1、3、5、7天腹腔注射抗CD40单克隆抗体(20ug/次),于造模第8天,处死所有各组小鼠。大体观察各组小鼠疾病活动指数(disease activity index, DAI),常规病理切片评估结肠组织病理学评分(histopathological score, HPS)。RT-PCR测定各组小鼠远端结肠中IFN-γmRNA、TNF-αmRNA的表达,ELISA法测定各组小鼠血清中IFN-γ、TNF-α含量的变化。结果(1)与对照组DAI(0.29±0.48)和HPS(0.16±0.32)相比,模型组小鼠DAI(6.21±1.25)和HPS(7.00±0.58)明显增高(p<0.05);与模型组相比,奥沙拉秦干预组C组DAI(4.58±2.36)和HPS(4.35±0.76)均有不同程度的下降(p<0.05);抗CD40单克隆抗体干预组D组DAI(3.98±1.86)和HPS(3.25±0.66)亦有不同程度的下降(p<0.05)(2)模型组IFN-γ mRNA、TNF-mRNA表达量(分别为3.21±0.26、1.23±0.36)明显高于对照组(分别为1.35±0.18、0.21±0.13)(p<0.05),奥沙拉秦干预后,IFN-γ mRNA、TNF-mRNA表达在C组(2.58±0.24、0.72±0.15)、抗CD40单克隆抗体干预组D组(2.34±0.25、0.59±0.18)均显著下降(p<0.05)。(3)对照组小鼠血清中IFN-γ、TNF-α的水平分别为(215.18±32.51)、(20.06±5.20),模型组小鼠血清中IFN-γ、TNF-α的表达比例分别为(953.32±40.96)、(42.97±8.76),模型组小鼠血清中IFN-γ、TNF-α的表达比例与对照组相比明显升高(P<0.05),奥沙拉秦干预后C组、抗CD40抗体干预组D组小鼠血清中IFN-γ、TNF-α的表达比例分别为C组(768.73±31.86)、(37.75±6.75)、D组(693.47±51.38)、(30.93±3.18),与模型组相比干预组均有明显降低(P<0.05);结论(1)抗CD40抗体干预组干预的UC小鼠模型大体症状可明显好转,结肠炎症程度亦得到明显减轻;(2)奥沙拉秦干预后C组、抗CD40抗体干预组D组的UC小鼠远端结肠中IFN-γ mRNA、TNF-αmRNA明显下降,提示促炎性细胞因子在UC发病中可能发挥重要作用;(3)抗CD40抗体干预的UC小鼠血清中IFN-γ和TNF-α的表达水平均明显下降;提示抗CD40单克隆抗体可下调效应细胞因子,减轻UC炎症。