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胃癌以发病率高,预后较差威胁着人类的健康。作为我国最常见的恶性肿瘤,胃癌的死亡率也高居恶性肿瘤的第三位。大部分患者发现时已是肿瘤晚期,这为治疗和病人生存带来了极大的困扰。一直以来胃癌的发生发展都是癌症研究领域的热门,但直至今日仍未建立起一套完整的学说,这也使我们临床治疗和早期诊断一直在一个阶段徘徊,始终没有找到合适的突破口。因此,完善胃癌的各项病理机制与进展理论对胃癌的临床诊疗与预后具有深远的意义。近年来随着生命科学领域从蛋白质组学向转录组学的重心转移,昔日称为“转录噪音”的lnc RNA被发现是参与调控生命过程的重要因素之一。因此,开展lnc RNA表达、作用和功能的研究,将有助于更进一步了解人类疾病特别是肿瘤的发病机制与进展过程。目的:检测并研究胃腺癌的lnc RNA表达谱,分析表达异常的lnc RNA与肿瘤的相关性,并初步探讨其在胃腺癌细胞株中所扮演的功能。方法:1.利用芯片技术检测并分析6对胃腺癌组织的lnc RNA表达谱。2.应用实时荧光定量逆转录PCR(q RT-PCR)初步验证异常表达的lnc RNA CTC-425O23.2(下称:lnc RNA CTC)在临床胃腺癌及配对的非癌胃组织中的表达。3.利用si RNA沉默技术,通过MTT、划痕损伤、Transwell、流式细胞技术测定从细胞水平初步探讨lnc RNA CTC对胃腺癌细胞功能的影响。4.运用生物信息学预测lnc RNA CTC在胃腺癌的发生与进展中可能参与的分子机制。结果:1.芯片结果显示,6例胃腺癌组织与配对的癌旁非癌组织相比,分别检测到约1700个上调及下调的lnc RNAs。异常表达的lnc RNA普遍参与到了细胞的各项生物进程中,在癌症的发生发展过程中发挥着重要作用。lnc RNA CTC在6对样本中均呈现上调表达。2.应用q RT-PCR对组织进行了验证结果显示:lnc RNA CTC在胃腺癌组织样本中呈上调表达,上调表达率为60.3(79/131),上调倍数为10.58。lnc RNA CTC的表达量与肿瘤大小、TNM分期、脉管侵袭、周围神经侵犯以及胃腺癌组织RRM1和Ki67表达水平相关,P<0.05,差异均具有统计学意义。3.初步细胞试验结果表明:以正常胃粘膜上皮细胞GES-1为对照,lnc RNA CTC在BGC-823、SGC-7901、MGC-803胃腺癌细胞中的表达均明显上调,P<0.05。si RNA瞬时转染胃腺癌细胞株BGC-823、SGC-7901,对lnc RNA CTC表达的敲减抑制作用明显。si RNA敲减lnc RNA CTC可降低胃腺癌细胞株SGC-7901、BGC-823的增殖能力(P<0.001)。si RNA敲减lnc RNA CTC后可抑制胃腺癌细胞株SGC-7901的迁移能力(P<0.0001)。si RNA敲减lnc RNA CTC后可降低胃腺癌细胞株SGC-7901的侵袭能力(P<0.0001)。si RNA敲减组的胃腺癌细胞与未经过处理的空白对照组在凋亡实验中无差异,lnc RNA CTC可能不作用于胃腺癌细胞SGC-7901的凋亡过程。4.母链基因AKT2在胃腺癌组织中的表达水平经q RT-PCR分析后显示,lnc RNA CTC的表达与AKT2的表达具有一定的相关性,r值=0.5873,P<0.0001。结果表明lnc RNA CTC的表达与AKT2的表达呈正相关,两者可能存在一定的相互作用。将lnc RNA CTC与其他在胃腺癌中验证的lnc RNAGK-IT1以及lnc RNA TRAF4-AS1的表达水平进行相关性分析,均无统计学意义上的相关。结论:1.胃腺癌组织的lnc RNA表达谱与癌旁组织的lnc RNA表达谱存在着明显差异,癌症的发生可能涉及到多种lnc RNA的异常表达。本课题选择的目标lnc RNA:lnc RNA CTC在6对检测标本中均有不同程度的上调表达。2.lnc RNA CTC可能参与了胃腺癌的发展暨由正常至癌前最后到癌症的转化。肿瘤大小、TNM分期、脉管侵袭、周围神经侵犯、胃腺癌组织RRM1和Ki67表达水平均与lnc RNA CTC的表达水平相关,初步结果提示:lnc RNA CTC可作为胃腺癌潜在的诊断标志物。3.Lnc RNA CTC在胃腺癌细胞株BGC-823、SGC-7901、MGC-803均过表达,经si RNA敲减抑制lnc RNA CTC表达后可抑制胃腺癌细胞的迁移、增殖以及侵袭,但对胃腺癌细胞的凋亡未产生显著影响。4.初步结果提示:lnc RNA CTC的表达与母链基因AKT2呈正相关,两者存在一定的共表达作用,相关机制有待进一步探讨。lnc RNA CTC与lnc RNAGK-IT1以及lnc RNA TRAF4-AS1在胃腺癌中的表达水平之间无统计学意义上的的相关性,说明不同的Lnc RNA的表达可能相互独立,且作用方式可能均具有生物学上的独立性。5.综上,本课题的结果初步表明lnc RNA CTC的表达异常与胃腺癌相关,检测lnc RNA CTC在胃腺癌组织中的表达,可以推测患者疾病的进展程度及判断患者的预后,lnc RNA CTC可能是胃腺癌的分子标志物之一。