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目的观察蝎毒多肽提取物(PESV)对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤血管内皮因子Ⅷ因子、а-SMA、Dll4、Notch1的表达及肿瘤新生微血管密度(MVD)与成熟度的影响,抑制肿瘤血管生成并进一步抑制肿瘤血管成熟,抑制新生血管功能,并进一步揭示PESV抗肿瘤的作用机理,从而将PESV与传统化疗药物以及抑制血管生成治疗相结合。方法1.建立Lewis肺癌皮下种植瘤模型,将动物随机分为荷瘤对照组、PESV组、阳性对照组、化疗组、化疗与PESV联合组、化疗与阳性对照联合组。检测瘤体积并计算抑瘤率,观察PESV对肿瘤生长的抑制作用。2.常规HE染色,光镜下观察瘤组织病理改变。3.免疫组织化学法检测瘤组织中Ⅷ因子、а-SMA、Dll4及Notch1蛋白水平表达。4. RT-PCR方法检测肿瘤组织中血管生成调控因子Dll4及Notch1基因水平的表达。结果1. PESV对Lewis肺癌生长的影响与荷瘤对照组相比,PESV对肿瘤重量的抑制作用不明显(P≥0.05),PESV组小鼠肿瘤重与荷瘤对照组相比,差异无统计学意义(P≥0.05),抑瘤率为14.95%。PESV组肿瘤重与阳性对照组相比,无显著性差异(P≥0.05)。化疗与PESV联合组与化疗组相比,差异显著(P≤0.05),抑瘤率为42.21%。化疗与PESV联合组肿瘤体积与化疗与阳性对照联合组相比,差异无统计学意义(P≥0.05)。2. PESV对Lewis肺癌肿瘤组织中微血管密度和血管成熟的影响Ⅷ因子表达于微血管内皮细胞胞浆,其表达情况可反映肿瘤组织的微血管密度;а-SMA表达于有功能的血管的基膜上,可用于标记肿瘤组织中有功能的血管,与组织中微血管数量相对比可反映肿瘤组织的血管成熟度。经半定量图像分析,PESV组与对照组、化疗与PESV联合组与化疗组相比较,肿瘤组织中微血管密度与血管成熟度前者均明显低于后者(P≤0.05)。PESV组与阳性对照组、化疗与PESV联合组与化疗与阳性对照联合组比较,肿瘤组织中微血管密度前者与后者无显著差异(P≥0.05),但PESV可降低肿瘤血管成熟度(P≤0.05),而阳性对照药物作用不明显(P≥0.05)。3. PESV对Lewis肺癌肿瘤组织中Dll4与Notch1表达的影响免疫组织化学染色显示,Dll4与Notch1阳性产物主要表达于肿瘤细胞胞浆与胞膜上,经半定量图像分析,PESV组与荷瘤组、化疗与PESV联合组与化疗组相比较,肿瘤组织中Dll4与Notch1表达水平前者均明显低于后者(P≤0.05)。PESV组与阳性对照组、化疗与PESV联合组与化疗与阳性对照联合组比较,肿瘤组织中Dll4与Notch1表达水平前者与后者无统计学差异(P≥0.05)。4. PESV对Lewis肺癌肿瘤组织中Dll4与Notch1基因水平表达的影响RT-PCR法检测肿瘤组织中Dll4、Notch1mRNA含量的差异。经半定量图像分析,PESV组与荷瘤对照组、化疗与PESV联合组与化疗组相比较,肿瘤组织中Dll4与Notch1表达水平前者均明显低于后者,差异据有统计学意义(P≤0.05)。PESV组与阳性对照组、化疗与PESV联合组与化疗与阳性对照联合组比较,肿瘤组织中Dll4与Notch1表达水平前者与后者无显著差异(P≥0.05)。结论1. PESV可抑制Lewis肺癌的生长。2. PESV可影响肿瘤血管生成。3. PESV对肿瘤的作用机制可能与影响肿瘤微环境中Dll4/Notch1信号通路有关。