论文部分内容阅读
第一部分:鞘内注射米诺环素对佐剂性关节炎性痛觉过敏的作用目的研究鞘内(i.t)注射米诺环素对完全氟氏佐剂(CFA)性关节炎性痛觉过敏的作用。方法1.行为学研究蛛网膜下腔置管成功的雄性SD大鼠,在右踝关节外侧皮下注射50μl CFA前30 min分别i.t生理盐水(NS)或12.5、25、50μg不同剂量的米诺环素,i.t每天1次,持续7d,观察后爪热刺激回缩潜伏期(PWTL)和机械缩足反射阈值(MWT)14d。CFA致炎后2d、6d,i.t米诺环素50μg,观察24h PWTL和MWT变化;右踝关节外侧皮下注射50μl NS前30min i.t米诺环素50μg、NS 20μ1,观察24 h的PWTL和MWT变化。2.形态学研究蛛网膜下腔置管成功的雄性SD大鼠分别i.t NS和米诺环素50μg后30min右踝关节外侧皮下注射CFA 50μl,i.t每天1次,持续7d,观察CFA后0、2、6d给药后4h和13d脊髓背角小胶质细胞标志物OX-42、星形胶质细胞标志物GFAP、神经元标志物Fos的表达。结果1.行为学研究结果i.t米诺环素不改变无炎症大鼠的PWTL和MWT;CFA致炎后PWTL缩短、MWT减小,米诺环素抑制致炎后PWTL缩短和MWT减小似呈剂量依赖性;预先及CFA致炎后2d米诺环素i.t可抑制PWTL缩短、MWT减小,第6d则无明显影响。2.形态学研究结果预先i.t米诺环素可以抑制CFA致炎后脊髓背角OX-42、GFAP、Fos的表达;CFA致炎后早期i.t米诺环素可以抑制脊髓背角OX-42、GFAP的表达;CFA致炎后后期i.t米诺环素可以减少脊髓背角OX-42表达,但不能抑制GFAP的表达。结论外周注射CFA可以诱导脊髓小胶质细胞激活;预先和反复鞘内注射米诺环素可以抑制脊髓小胶质细胞激活,减轻炎性痛觉过敏;脊髓小胶质细胞可能参与炎性痛觉过敏的调节。第二部分:鞘内注射米诺环素对CFA诱导的脊髓促炎性细胞因子表达的影响目的观察CFA诱导的外周炎症对脊髓促炎性细胞因子表达的影响和鞘内注射米诺环素的作用。方法蛛网膜下腔置管成功的雄性SD大鼠分别i.t NS和米诺环素30min后右踝关节外侧皮下注射CFA,i.t每天1次,持续7d,观察CFA后4h,2、6d、13d后爪PWTL和MWT的变化及CFA致炎后0,2、6d给药后4h和13d脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α表达变化。结果CFA致炎后同侧后肢PTWL缩短和MWT减小,预先和反复i.t米诺环素抑制PTWL缩短和MWT的减小:CFA致炎后0,2、6d给药后4h和13d脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α表达明显增加,预先和反复i.t米诺环素减少相应时点脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平。结论外周注射CFA诱导脊髓促炎性细胞因子分泌增加;预先和反复鞘内注射米诺环素可以减少外周炎症诱导的脊髓促炎性细胞因子分泌;脊髓小胶质细胞可能通过促炎性细胞因子介导炎性痛觉过敏。第三部分:鞘内注射米诺环素对CFA诱导的脊髓Pp38MAPK表达的影响目的观察CFA诱导的外周炎症对脊髓Pp38MAPK蛋白表达变化和米诺环素鞘内注射对其表达的影响。方法蛛网膜下腔置管成功的雄性SD大鼠分别i.t NS和米诺环素30min后右踝关节外侧皮下注射CFA,i.t每天1次,持续7d,观察CFA后4h、2、6、13d的PWTL和MWT的变化及CFA致炎后0,2、6d给药后4h和13d脊髓Pp38MAPK蛋白表达变化。结果CFA致炎后同侧后肢PTWL缩短和MWT减小,预先和反复i.t米诺环素可以抑制PTWL缩短和MWT的减小;CFA致炎后0、2、6d给药后4h和13d脊髓Pp38MAPK蛋白表达增加,预先和反复i.t米诺环素可以抑制相应时点脊髓Pp38MAPK的表达,但仍比基础值增加。结论外周注射CFA可以诱导脊髓Pp38MAPK表达增加;预先和反复鞘内注射米诺环素可以抑制CFA诱导的脊髓Pp38MAPK的表达;脊髓小胶质细胞可能通过p38MAPK调节炎性痛觉过敏。