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目的: 1.研究脾气虚证与寻常型银屑病的相关性,为临床治疗提供科学理论依据。 2.初步探索寻常型银屑病肠道免疫功能情况,以完善银屑病发病机制的研究。 方法: 1.临床研究:从317例寻常型银屑病患者中纳入合并脾气虚证的患者52例,分析52例的患者性别、年龄构成比,及银屑病病情轻重、PASI评分和从血辨证的情况。同时从这52例患者中筛选出15例患者作为研究对象,并与15例寻常型银屑病非脾气虚患者及15例健康体检者作比较。留取清晨粪便标本,-80℃密封保存,留作肠道菌群多样性检测。 2.动物实验:将52只C57BL/6雌性小鼠随机分成四组:银屑病脾虚组、银屑病组、脾虚组、空白组。银屑病脾虚组、脾虚组小鼠先采用番泻叶苦寒泻下合营养限制法制作脾虚模型,连续21天,并于脾虚造模的第16天加入银屑病造模过程,至第21天双重造模结束。观察小鼠的活动、精神、大小便、毛发等一般体征,银屑病模型小鼠记录PASI评分和皮损HE病理检查。计算小鼠脾脏指数,并采用ELISA法检测小鼠小肠组织细胞因子IL-17、IL-6、IL-23、TNF-α、TGF-β的含量,流式细胞术检测小鼠肠系膜淋巴结Th17和Treg细胞在CD4+T淋巴细胞中的表达量。 结果: 1.银屑病脾气虚证患者一般资料分析:所纳入的52例患者男女性别比为1.2∶1,年龄构成以40-50岁为主;皮疹PASI评分偏低,身体各部位红斑、鳞屑、浸润情况比较可发现:下肢红斑、BSA、PASI均较其他各部位程度更重,头部鳞屑较其他各部位均明显,浸润情况身体各部未见明显差别。结合从血辨证的结果,患者多伴见血燥、血瘀两证。 2.肠道菌群多样性分析:三组粪便样本肠道菌群相比,寻常型银屑病脾气虚组丰度指数高于正常组,多样性指数和F/B值寻常型银屑病脾气虚组和寻常型银屑病非脾气虚组均高于正常组,且寻常型银屑病脾气虚组与正常组相比,差异有显著性。 3.动物实验结果:3.1银屑病脾虚病症结合模型的建立:造模结束后小鼠出现体重明显下降、活动减弱、蜷缩、扎堆、被毛杂乱、大便异常等脾虚证的表现,小鼠背部皮肤见红斑、鳞屑、浸润等典型的银屑病样皮疹,皮损病理图片也符合银屑病病理改变,提示银屑病脾虚小鼠模型建立成功。3.2免疫指标检测结果:银屑病组小鼠脾脏指数、小肠组织细胞因子IL-17、IL-23、IL-6、TNF-α、TGF-β1的含量及肠系膜淋巴结Th17细胞的表达量明显高于空白组(P%0.05);银屑病脾虚组小鼠脾脏指数、肠系膜Th17的表达量较空白组明显上升(P%0.05);脾虚组脾脏指数较正常组降低,细胞因子IL-23、TNF-α、TGF-β1的含量则高于正常组(p%0.05)。 结论: 1.根据纳入的患者资料分析,寻常型银屑病合并脾气虚证患者可能多见于中年人,皮疹以下肢为重。 2.肠道菌群丰度及多样性结果可以发现,寻常型银屑病患者可能存在肠道菌群失调情况,合并脾气虚证可能加重菌群失调。 3.肠道菌群检测结果发现,寻常型银屑病脾气虚证以厚壁菌门为最主要的优势菌,同时与变形菌门的脱硫弧菌目和脱硫弧菌科关系密切。 4.银屑病脾虚模型小鼠皮疹模型出现时间晚于银屑病组,可能与脾虚免疫抑制有关。 5.银屑病模型小鼠出现肠道炎症因子及Th17细胞表达的增加,提示银屑病模型小鼠可能伴有肠道免疫功能异常的改变。银屑病脾虚模型可见肠道Th17细胞表达的升高,提示银屑病脾虚模型小鼠也存在肠道免疫功能的异常。 6.银屑病脾虚模型小鼠出现典型的脾虚证表现及银屑病样皮疹改变,提示银屑病脾虚病症结合小鼠模型制作成功。