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弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)在成人群体中是非霍奇金氏淋巴瘤中最常见的一个亚类,约占所有非霍奇金氏淋巴瘤的30-40%。DLBCL是一种异质性很高的淋巴瘤,其临床表现多样,在形态学、遗传学、免疫表型以及预后等方面都表现出很高的异质性。目前根据B细胞分化所处的阶段将其分为两个分子亚群：生发中心来源的弥漫性大B细胞淋巴瘤和活化B细胞来源的弥漫性大B细胞淋巴瘤。这两种亚型的DLBCL来源于处在不同分化阶段的B细胞,各自具有独特的生物学特征：在GCB亚型的DLBCL中普遍存在BCL2基因的染色体异位,而在ABC亚型的DLBCL中,肿瘤细胞中通常存在各种基因突变从而导致NF-kB信号通路的持续活化来维持肿瘤细胞的存活。近年来对基因组的研究发现,在DLBCL中普遍存在组蛋白和染色质修饰相关的表观遗传调节因子基因表达异常,并且影响了DLBCL的发生和进展。在这些表观遗传调节因子中,JMJD3是含有JmjC结构域的酶家族的成员,其主要功能是通过调节H3K27的去甲基化,从而调节目的基因的表达。目前研究发现JMJD3在抗原驱动的B细胞的活化过程中起着重要作用,并且在霍奇金淋巴瘤中普遍存在JMJD3过表达的现象。但是其在DLBCL发生发展过程中的作用及其内在的分子机制现在尚未明确。我们的研究旨在明确JMJD3在DLBCL肿瘤发展过程中的调控作用和内在的分子调控机制。为了探索JMJD3在DLBCL发生和进展中的作用,我们检测了DLBCL肿瘤组织中JMJD3的表达情况。通过对100例DLBCL肿瘤组织的免疫组织化学染色,我们发现和正常淋巴结组织相比,JMJD3在DLBCL肿瘤组织中普遍存在高表达的现象。接下来我们进一步检测了HMy2.CIR和七株DLBCL肿瘤细胞系中JMJD3的表达情况,同样发现在大部分肿瘤细胞系中JMJD3表达水平较高。接下来我们检测了JMJD3对DLBCL肿瘤细胞生物学特征的影响,首先检测了过表达或者沉默JMJD3对DLBCL肿瘤细胞活力和凋亡的影响,结果发现在DLBCL肿瘤细胞中过表达JMJD3能够增强肿瘤细胞的活力,沉默JMJD3的表达能够诱导肿瘤细胞发生凋亡。然后进一步对JMJD3在DLBCL抗凋亡作用中的内在分子机制进行探讨。我们检测了JMJD3对干扰素调节因子家族基因的影响,结果发现在两种亚型的DLBCL中JMJD3都能够正向调节IRF4的表达,ChIP实验证明JMJD3能够调节IRF4启动子区域结合组蛋白的甲基化水平。但是接下来的研究发现在不同亚型的DLBCL中,JMJD3通过不同的分子机制调控DLBCL肿瘤发展。在ABC亚型的DLBCL中,在沉默JMJD3的基础上过表达IRF4能够缓解沉默JMJD3引起的肿瘤细胞的凋亡,说明IRF4介导JMJD3的抗凋亡作用。进一步研究发现,JMJD3-IRF4调节信号主要是通过调节下游的NF-kB信号通路的活化来维持肿瘤细胞的存活。转录因子IRF4可以通过调节NF-kB信号通路的活性来调节JMJD3的表达,JMJD3-IRF4-NF-KB形成一个对于维持肿瘤细胞存活起着重要作用的正反馈调节环路。在GCB亚型的DLBCL中,JMJD3通过调节抗凋亡蛋白BCL2的表达来维持肿瘤细胞的存活。通过ChIP实验证明JMJD3能够调节BCL2启动子区域结合组蛋白的甲基化水平,提示BCL2是另一个JMJD3的下游靶基因。在沉默JMJD3的基础上过表达BCL2能够缓解沉默JMJD3引起的肿瘤细胞的凋亡,说明BCL2介导GCB亚型的DLBCL中JMJD3的抗凋亡作用。在ABC亚型的DLBCL中,在沉默JMJD3的基础上过表达BCL2能够部分缓解沉默JMJD3引起的肿瘤细胞的凋亡,提示BCL2也参与了ABC亚型的DLBCL中JMJD3的抗凋亡作用。在ABC亚型和GCB亚型的DLBCL小鼠肿瘤模型中,瘤内多点注射JMJD3siRNA都可以抑制肿瘤的生长同时诱导肿瘤细胞发生凋亡。通过上述实验,我们主要得出以下结论：在DLBCL中,JMJD3通过抗凋亡作用维持DLBCL中瘤细胞的存活；在ABC亚型的DLBCL中, JMJD3主要通过调节IRF4的表达从而进一步影响NF-kB信号通路的活性来维持肿瘤细胞的存活,JMJD3-IRF4-NF-kB形成致瘤性的正反馈调节环路；在GCB亚型的DLBCL中,JMJD3主要通过调节抗凋亡蛋白BCL2的表达来维持肿瘤细胞的存活；瘤内多点注射JMJD3siRNA可以抑制肿瘤的生长同时诱导肿瘤细胞发生凋亡。综上所述,由于JMJD3对于维持DLBCL中瘤细胞的存活起着重要作用,提示JMJD3可能是治疗DLBCL的潜在靶点,针对于JMJD3设计特异的小分子抑制剂,将为临床上DLBCL的靶向治疗提供新的思路。