爱滋病(AIDS)是由人类免疫力缺陷病毒HIV(HumanImmunodeficiencyVirus)引起的免疫细胞死亡而产生的综合征，是一种死亡率极高的病毒感染性疾病。齐多夫定(AZT)是目前公认的一种用于治疗和预防HIV感染、包括相关的临床病症如AIDS、AIDS相关综合症(ARC)、AIDS痴呆综合症(ADC)以及对患者无症状HIV感染或抗HIV抗体呈阳性的患者进行治疗的非常重要且有效的化疗药物。该药虽有一定的毒副作用，但由于该药疗效稳定可靠，在我国尚未开发，为四类新药。因此，研究开发该药仍有重大的社会效益和经济效益。 一、原料药生产工艺 齐多夫定的合成路线很多，主要以胸腺嘧啶脱氧核苷(即胸苷)为主要原料。文献报道典型的路线有两条：一是从胸苷开始，与羧酸反应生成酯，保护5位伯醇羟基，然后经成“氧桥”，上“叠氮”，最后脱保护得齐多夫定；一是从胸苷开始与三苯甲基氯反应成醚，保护5位伯醇羟基，再经成“氧桥”，上“叠氮”，最后脱保护得齐多夫定。 1.羧酸成酯保护路线： 2.三苯甲基氯成醚保护路线： 我们对两条路线进行了探索性研究，根据试验结果，结合原料来源及价格，选择路线1即羧酸成酯保护路线，并对分离提纯，产品精制等进行了改进。按该工艺合成所得产品收率约60％，含量按质量标准分析均在98.5％以上。 二、结构确证： 通过理化常数测定，元素分析(郑州大学分析测试中心)、红外光谱、紫外光谱、核磁共振氢谱(1HNMR)(郑州大学分析测试中心)、核磁共振碳谱(13CNMR)(郑州大学分析测试中心)、质谱(MS)(郑州大学分析测试中心)、粉末X-射线衍射(XRD)等分析手段，证明本品结构为： 三、理化性质，纯度检查，含量测定等有关质量研究 质量检验用对照品，参考文献，对合成所得齐多夫定进行精制，以HPLC分析含量，按峰面积归一法计99.6％。 (一)理化性质 1.溶解度：按中国药典2000年版二部溶解度测定法，测定了本品在几种常用溶剂中的溶解度，在水、氯仿、乙醚中微溶，乙醇、丙酮中溶解，碱中易溶。 2.比旋度：按中国药典2000年版二部比旋度测定法，测定了本品的比旋度，均在+60.5～+63°之间。 3.酸度：按中国药典2000年版二部玻璃电极法测定了本品的酸度，本品呈酸性，PH值约为6.0。 4.紫外吸收：按中国药典2000年版二部紫外吸收的规定，测定了本品在中性、酸性和碱性介质中的紫外吸收，结果是：在水、氢氧化钠和盐酸介质中，最大吸收波长均是265.6nm，在乙醇中是263.6nm。吸收系数分别是：E％1cm(水)=374.9，E1％1cm(醇)=387.2，E1％1cm(NaOH)=329.8，E1％1cm(HCl)=440.4 此外，还对其熔点，溶液澄清度与颜色，红外、X-射线衍射等进行了分析。 (二)鉴别：根据本品的结构，可供鉴别反应的基团化学反应极少，可用物理参数较多，分别研究了红外、X-射线衍射、紫外、高效液相等，参考英美药典，采用红外及高效液相法较合适。 (三)纯度检验： 根据合成工艺特点，参考英美药典检验项目，重点研究下面几项： 1.水份：英美药典都对本品水份进行测定，美国药典所用方法是费休氏法。 我们亦用该法对其水份进行了测定，结果显示，该法快速、准确，所测样品含水份均在1％以下。 2.炽灼残渣：英美药典也有该项测定，主要检查所含无机物量，我们按中国药典规定方法对样品进行了测定，结果显示灼炽残渣均在0.2％以下。 3.重金属：英美药典对此没有要求，考虑到其是毒性较大杂质，对其进行了研究。按中国药典规定方法(第三法)对样品进行了测定，结果显示，重金属含量不超过20ppm，说明含量较低。 4.砷：英美药典对此没有要求，考虑到其毒性较大，进行了相应研究，按中国药典规定方法(古蔡氏法)对样品进行了分析，结果显示砷含量小于0.4ppm。 5.有机杂质检查： 采用HPLC法，对合成中可能引入的杂质及降解可能产生的杂质进行了研究，结果发现，样品中所含有机杂质主要有三种，其中两种是合成中引入的对甲氧基苯甲酸和“氧桥物”，另一种是分解产物胸腺嘧啶，这与英美质量标准中控制杂质明显不同。对测定方法进行了研究，如最低检测限度、线性关系、精密度等。结果显示方法可行，正常样品中三种杂质含量均低于1.0％，杂质总含量少于3.0％。 6.根据工艺增加甲醇残留量检查 合成齐多夫定时，使用了甲醇作溶剂，因此在质量标准中增补了甲醇残留量检查。对甲醇残留量的检查，目前中国药典、美国药典、英国药典均无相应方法，但均有有机挥发杂质检查。我们参考中国药典及美国药典中有机挥发杂质检查法，结合本品的特点，采用气相色谱法研究了样品中甲醇的残留量。在研究中发现，样品中所含主要有机挥发杂质为溶剂a(AZT提纯时，使用了溶剂a)，故除检查甲醇外，又增补了溶剂a残留量检查。 7.含量测定： 参考英美药典，采用HPLC法对其含量测定进行了研究，经筛选合适的测定条件是：C18柱(250×4.6mm，5μm)；检测波长265nm；流动相：甲醇：水=5∶5；流速1ml/min。并对其方法进行了研究。用该法对样品进行了测定，结果显示，样品含量均在97.0～102.0％之间。 四、稳定性研究： 从结构上看，AZT有一个苷键，易断裂生成胸腺嘧啶，使产品含量降低，杂质增多。在稳定性研究中，重点考查项目就是主产品含量及杂质胸腺嘧啶的含量变化。按有关要求，做了影响因素试验，加速试验和长期试验。 (一)影响因素试验： 分别考查了强光、高温、高湿对产品的影响。 按《临床前研究指导原则》及中国药典2000年版对稳定性考察的要求，进行试验，结果显示：强光照射10天，外观由白变黄，产品含量明显降低(由99.77％降至97.69％)，杂质胸腺嘧啶含量明显升高(0.121％升至1.258％)，杂质总含量也明显升高，由0.667％升至1.973％。 高温条件下(60℃：10天)外观由白变为浅黄，产品含量有所降低(由99.77降为98.22％)；杂质胸腺嘧啶有所升高(由0.121％升至0.207％)；杂质总含量也有所升高(由0.667％升至0.926％)。 高湿条件下，产品外观、含量、杂质胸腺嘧啶及杂质总含量均无明显变化。说明：强光对其影响最大，其次是高温，湿度对其影响较小。 (二)加速试验： 按中国药典2000年版的要求，进行40℃，RH75％的加速试验，结果显示，3个月时，外观基本不变，含量略有降低(最多降低0.43％)，胸腺嘧啶和杂质总量均变化不大，说明该产品较为稳定。 (三)长期试验： 按中国药典2000年版的要求，进行试验，结果显示3个月时，外观、含量、杂质均无明显变化。 五、质量标准及起草说明： 参考英美药典，结合本品工艺及质量研究结果，制定了质量标准。 含量测定采用HPLC法，并按对照品外标法进行测定。 鉴别也借鉴英美药典，采用红外光谱法和高效液相法。 杂质重点检查对甲氧基苯甲酸，胸腺嘧啶和“氧桥物”，仍采用HPLC法。英美药典中规定胸腺嘧啶含量按归一法不大于3.0％，根据我们对产品分析结果，规定单个杂质不大于1.0％，所有杂质总和不大于3.0％。 参考英美药典，产品含量按干燥品计，定为97.0～102.0％。