目的:酵母Elongator复合物由6个亚基组成,它作为一个具有组蛋白乙酰基转移酶（histone acetyltransferase, HAT）活性的复合体,协助高度磷酸化的RNA聚合酶II（RNA polymerase II,RNAPII）参与SSA3、GAL1等基因的转录延伸过程。Elp3是高度保守的组蛋白乙酰转移酶复合物Elongator的催化亚基,其亚基C端的保守区是组蛋白乙酰基转移酶活性结构域,在N端存在第二结构域—潜在的组蛋白去甲基化酶活性结构域。多数研究结果表明Elp3作为一个HAT协助RNAPII参与GAL1、SSA3等基因的转录延伸过程。研究表明酵母Elp3的N端SAM类似结构域可能与甲基化有关,但另外的研究者认为该结构域不具有催化活性,而与完整复合物的形成有关。目前尚不确定Elp3是否拥有生物信息学推测的组蛋白去甲基化酶活性,也不清楚Elongator转录功能与组蛋白甲基化有何关联。为了解组蛋白甲基化时完整及N端结构域缺失Elp3是否参与GAL1、SSA3基因的转录,确定Elp3转录功能与组蛋白特定位点甲基化的关系。本文以特定甲基化位点突变（H4K20、H3K79、H4K20/H3K79）elp3Δ菌株为实验材料,通过染色质免疫沉淀实验确定组蛋白特定甲基化位点突变对完整及第二结构域缺失Elp3转录功能的影响。这些研究对于建立酵母Elongator通过表观遗传修饰参与基因表达调控的模型,进一步研究人Elongator功能、探索与其功能异常相关的疾病的发生机理具有重要意义。方法:本实验运用Elp3抗体对转入Elp3系列质粒的组蛋白突变elp3Δ菌株进行染色质免疫沉淀,以Input DNA和沉淀DNA作模板进行特异引物的PCR,确定特定组蛋白甲基化位点突变对完整及第二结构域缺失的Elp3转录功能的影响。结果: 1.染色质免疫沉淀实验证明:在SSA3基因的转录过程中,组蛋白甲基化位点突变对完整及第二结构域缺失的Elp3转录功能的影响不同,Elp3功能与甲基化位点有一定关系。2.染色质免疫沉淀实验证明:GAL1基因的转录过程中,组蛋白甲基化位点突变不同程度影响了完整及第二结构域缺失的Elp3的转录功能,虽然酵母和人Elp3在功能上高度保守,但仍有差别,对第二结构域缺失的Elp3的招募量较低,表明第二结构域是Elp3行使正常功能所必需。