二甲双胍增敏顺铂抗卵巢癌相关microRNA鉴定及其调控信号通路研究

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qnmdmmm
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
第一部分葡萄糖浓度对二甲双胍增敏顺铂抑制卵巢癌细胞的影响目的:探讨不同葡萄糖浓度培养条件对二甲双胍(metformin,MET)增敏顺铂(Cisplatin,DDP)杀伤卵巢癌细胞的影响。方法:采用实时无标记细胞分析技术(RTCA),分别检测MET单药、DDP单药、MET配伍DDP对卵巢癌细胞株SKOV3、A2780、SKOV3-GFP、SKOV3-GFP/DDP的抑制作用,比较不同葡萄糖浓度对卵巢癌细胞株的抑制作用,运用compusyn软件通过联合指数(CI)的大小判断MET和DDP作用的相互关系。结果:低葡萄糖培养液提高MET对卵巢癌细胞SKOV3、A2780、SKOV3-GFP、SKOV3-GFP/DDP增殖的抑制(P<0.001),同时增强MET配伍DDP杀伤SKOV3、A2780、SKOV3-GFP/DDP的作用(P<0.05),根据使用软件compusyn根据CI的大小判断出,在低葡萄糖培养条件下,MET和DDP能更好的发挥协同作用,高糖培养条件可能造成MET拮抗DDP。结论:低葡萄糖培养条件有助于MET提高DDP杀伤卵巢癌细胞作用,而高糖培养抑制MET增效DDP。第二部分二甲双胍增敏顺铂抗卵巢癌相关miRNA及其下游调控通路鉴定目的:鉴定MET增敏DDP抑制卵巢癌细胞的相关miRNA,及检测可能参与MET增敏DDP调控通路。方法:实时荧光定量聚合酶扩增法(QRT-PCR)比较不同葡萄糖浓度下,单药MET、DDP和MET配伍DDP对相关miRNA表达量的影响,通过生物信息学分析相关miRNA可能参与调控的蛋白通路,预测MET增敏DDP的相关通路,Western Blot(WB)验证该通路节点蛋白的变化。结果:QRT-PCR结果显示,低葡萄糖浓度培养条件下,促进MET配伍DDP下调卵巢癌细胞株SKOV3、A2780、SKOV3-GFP/DDP中miR-33b,miR-214、miR-503和miR-214的相对表达量(P<0.05),而在SKOV3-GFP细胞中,相关miRNA的相对表达量上升。生物信息学分析结果表明MET可能通过抑制miR-214介导的TGFβ-Wnt-上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)循环反馈网络,抑制卵巢癌细胞的铂类耐药,WB结果显示相对于单药MET和DDP,MET配伍DDP处理后能激活AMPK通路,抑制m TOR、TGF-beta、WNT/β-Catenin蛋白通路。结论:MET增敏DDP杀伤卵巢癌细胞株的作用可能是通过下调miR-33b,miR-214、miR-503和miR-129的相对表达量实现的,而低葡萄糖培养条件miRNA相对表达量下降更为明显;MET参与调控miR-214可能靶向的蛋白通路;MET能够激活AMPK和抑制TGFβ/Wnt/m TOR信号通路进而逆转顺铂耐药。第三部分探究miR-214模拟物&抑制剂对二甲双胍增敏顺铂抗卵巢癌特性及下游调控通路影响目的:探讨瞬时转染miR-214模拟物和抑制剂对MET增敏DDP抗卵巢癌相关调控通路的影响。方法:细胞株SKOV3瞬时转染miR-214模拟物和抑制物,瞬时转染采用QRT-PCR方法验证转染后miR-214表达量,Western Blot比较转染miR-214模拟物或抑制剂前后,MET增敏DDP对Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果:QRT-PCR结果表明miR-214抑制物降低miR-214的相对表达量,miR-214模拟物增加miR-214的相对表达量,证明瞬转成功,与空载组和空白组相比,miR-214模拟物组在MET配伍DDP后Wnt/β-catenin信号通路Wnt1、P-β-catenin和β-catenin蛋白表达增强,转染miR-214抑制物可进一步抑制MET抑制的Wnt/β-catenin通路。结论:MET逆转miR-214靶向的Wnt/β-catenin通路导致的卵巢癌顺铂耐药。
其他文献
目的:1.调查肿瘤科护士心理资本、工作倦怠的现状,分析其工作倦怠的影响因素,并探讨肿瘤科护士心理资本与工作倦怠的关系。2.构建并验证基于心理资本的肿瘤科护士工作倦怠预测模型,为肿瘤科护士工作倦怠的预防和干预提供依据。方法:第一部分:2018年3月~8月,采用多阶段随机抽样选取广西2所肿瘤专科医院和全区23所三级甲等医院1224名肿瘤科护士进行一般资料问卷、工作倦怠量表(MBI-General Su
目的:(1)通过搜集乳腺癌(Breast cancer,BC)病例标本进行免疫组化实验了解VAMP7、VAMP8基因在BC组织中的蛋白差异表达,分析目标基因与临床病理参数之间的关系,为明确其在BC中的作用提供临床数据支持;(2)通过构建VAMP7、VAMP8基因敲低的稳定转染表达BC细胞系及进行相关细胞功能实验,分析VAMP7、VAMP8基因影响BC细胞系的功能作用;(3)通过多平台搜集及整合BC
目的:喉部在周围环境和身体核心内环境平衡之间起着至关重要的缓冲作用,喉内肌是承担着人类呼吸、吞咽及发声等复杂功能的重要组织,喉癌是常见的头颈部恶性肿瘤之一,喉部手术或放、化疗患者不同程度地损害了吞咽、呼吸,发声等功能。临床及科学研究中应用肩胛舌骨肌瓣替病废情况下的声带以及行喉移植。以恢复及重建喉功能。本课题组前期实验已证实喉内肌与舌骨上、下肌肌电生理特性。下颌舌骨肌、甲状舌骨肌与环杓侧肌肌电生理相
目的:探讨系统免疫炎症指数(systemic immune-inflammation index,SII)及预后营养指数(prognostic nutrition index,PNI)与脊柱内固定融合术后早期手术部位感染(surgical site infection,SSI)的相关性,为及早诊断脊柱内固定融合术后SSI,及早采取措施提供临床参考。方法:回顾性分析广西医科大学第一附属医院于2019
基于5G通信、智能制造、云计算与存储的快速发展,对数据中心的支持设施的稳定与可靠性提出了越来越高的要求,分析传统的运维管理方式融合通信技术、网络技术、控制技术、数据技术的动力环境监控系统从而支持设施运维的要求,降低人工成本。
文章首先介绍了建构主义学习理论和教学模式,然后分析了高校双语教学现状,最后以“风险管理”教学为例,对建构主义指导下高校双语教学实践进行了探讨。
整机柜服务器作为一种技术框架和交付模式的创新,在电信运营商着广泛的应用前景,文章详细介绍了整机柜服务器的发展情况及优势,总结了应用场景。以某节点资源池部署实践为例,对数据中心配套基础设施建设提出了建议,对后续发展进行了展望。
目的:孙氏手术目前为A型主动脉夹层的标准外科术式,也是目前本中心治疗A型主动脉夹层的常用手术方式。本研究根据主动脉夹层细化分型,对行孙氏手术的A型主动脉夹层患者的围术期临床疗效进行对比分析,旨在探讨孙氏手术对不同细化分型的A型主动脉夹层的围术期临床疗效是否有差异。方法:选择广西医科大学第一附属医院2013年1月至2019年5月行孙氏手术的A型主动脉夹层患者共120例。根据主动脉夹层细化分型将其分为
目的:通过生物信息学的方法寻找与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关肝癌发生发展相关的免疫基因,并建立风险预测模型。为后续HBV相关肝癌患者的风险预测提供模型参考,并为临床预后免疫研究工作提供相关标志物。方法:(1)从TCGA数据门户网站(https://cancergenome.nih.gov/)下载HCC样品的RNA-seq数据,对测序的原始数据进行标准化处理,从而获
阐述数据中心交换机VSU组网及智能设备间联动控制的现状、存在的问题,提出一种基于CAN总线联动控制系统平台的全新数据中心模块化交换机与智能设备的联动控制设计方案,从而满足数据中心运用的高灵活性、高智能化设备管理的要求。