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本文以广西甜茶为研究对象,通过热水浸提、溶剂萃取、柱层析等方法对广西甜茶中抗过敏活性物质进行提取、分离和纯化,抗过敏活性采用透明质酸酶及β-己糖苷酶的抑制能力来评价。薄层层析、高效液相色谱-质谱联用等方法对抗过敏活性物质进行结构分析。通过各组分抗过敏能力的对比以及该组分物质结构的分析,初步解释甜茶中抗过敏活性的物质基础以及组分中物质种类与其抗过敏能力的关系,为广西甜茶中抗过敏活性物质分离纯化工艺的优化以及甜茶中抗过敏活性物质的应用提供一定的理论依据。实验结果如下:
通过溶剂萃取及聚酰胺树脂、Sephadex LH20树脂柱层析分离,得到黄酮含量大于58%的组分T7,多酚含量大于96%的组分T9以及甜茶素含量大于98%的组分T10,分析了甜茶的活性成分含量与其活性的相关性,表明甜茶多酚含量与甜茶抗过敏活性存在最显著的相关性,多酚含量最高的组分为T9,其抗过敏活性最强。这些研究为甜茶抗过敏活性成分的结构鉴定以及构效关系的初探打下基础。
采用高效液相色谱-质谱联用的方法,分别鉴定纯化过程中强抗过敏活性组分T、T1、T9中物质的种类,分析组分中各物质的质谱裂解方式。其中分析了组分T中的11个黄酮及其苷类物质,4个GOD型鞣花鞣质,而凝胶纯化后的组分T9中初步鉴定了3个物质,结构推测为:Rubusuaviin A、Rubusuaviin B以及鞣花酸。同时,初步探讨了广西甜茶强抗过敏活性的物质基础,并结合已报道的鞣花鞣质的体内降解途径,得出广西甜茶抗过敏活性与甜茶中的GOD型鞣花鞣质、鞣花酸以及鞣花酸型黄酮糖苷的存在有重要关系的结论。