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目的：1.了解polo-like kinase 1 (Plk1)基因在正常肝组织、癌旁组织及肝癌组织的表达差异。2.建立稳定表达Plkl沉默的人肝癌BEL-7402细胞亚株-PlklsiRNA 251细胞,检测其Plkl表达水平及其细胞周期的变化情况。3.建立Plk1siRNA251细胞及肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型,比较两组移植瘤生长及病理检测的差异。4免疫组化、半定量RT-PCR及Western blot技术检测Plk1过表达与Cdc25c及survivin的关系。方法：1.免疫组织技术了解人肝癌细胞癌标本中Plk1的表达部位；RT-PCR、Western blot检测Plk1基因mRNA及蛋白质表达水平。2.合成、鉴定Plk1 siRNA质粒；电转染siRNA质粒于人肝癌BEL-7402细胞,经G418筛选获得稳定表达沉默Plk1的人肝癌BEL-7402细胞株(PlklsiRNA251细胞)。RT-PCR、Western blot检测PlklsiRNA 251及肝癌BEL-7402细胞P1k1的表达水平；流式细胞仪检比较它们细胞周期的变化。3.建立Plk1siRNA 251及人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型,比较它们在成瘤时间、成瘤率、及肿瘤生长变化的差异,绘制移植瘤生长曲线图；H.E染色及Tunel试验检测肿瘤坏死及凋亡情况。4.两组移植瘤组织行免疫组化检测Plk1及Survivin的表达。RT-PCR及Western blot检测它们Cdc25c及survivin的mRNA及蛋白质表达水平。结果：1.免疫组化检测Plk1在肝癌组织呈阳性表达,在癌旁及正常肝组织呈弱阳性及阴性表达。RT-PCR及Western blot检测：肝癌组织Plkl mRNA及蛋白质表达水平明显高于癌旁组织及正常肝组织。(p<0.01)2.将成功获取Plk1siRNA251质粒经电转染入人肝癌BEL-7402细胞,经G418筛选获取PlklsiRNA251细胞,与人肝癌BEL-7402细胞相比,Plk1siRNA251细胞Plkl的mRNA及蛋白质呈低表达水平；且多停滞于G2/M期。3.成功建立PlklsiRNA251与人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型,这两组移植瘤模型在成瘤时间、成瘤率、及肿瘤生长速度上有统计学差异；H.E染色及Tunel检测发现两者移植瘤细胞形态上没有明显改变,但Plk1siRNA251移植瘤组存大量核固缩及凋亡小体,而BEL-7402移植瘤组核固缩及凋亡小体少见。高倍显微镜下凋亡小体计数,两者有显著性差异(p<0.01)4.PlklsiRNA251组及BEL-7402组移植瘤mRNA及Western blot检测行Cdc25c及survivin的表达有显著性差异(p<0.01)。免疫组织检测显示：Plk1siRNA251组移植瘤的Plkl及Survivin呈阴性表达。而BEL-7402组移植瘤呈阳性表达。提示Plkl的过表达可能引起Cdc25c及survivin表达水平增高。结论：1.Plkl在肝癌组织中过表达,癌旁肝硬化的及正常组织中低表达。2.与肝癌BEL-7402细胞相比,Plk1siRNA251细胞Plk1的mRNA及蛋白质呈低表达水平,且多停滞于G2/M期。3.与BEL-7402移植瘤比较,Plk1siRNA251组移植瘤在成瘤时间、成瘤率、及肿瘤生长速度上有统计学差异,Plk1siRNA251组移植瘤存在明显的凋亡小体。4.Plk1siRNA251与BEL-7402移植瘤组织的Cdc25c、survivin的mRNA及蛋白质水平存在差异。Plk1siRNA251组移植瘤Plk1及survivin免疫组化呈阴性表达而BEL-7402组移植瘤免疫组化呈阳性表达。Plkl过表达的致癌作用可能是促进肝癌细胞增殖、抑制肝癌凋亡及逃避检检验点的捕获。