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木瓜凝乳蛋白酶（Chymopapain）是木瓜蛋白酶粗品中含量最高的一种酶，具有凝乳和蛋白水解能力，在治疗骨质增生、肿瘤的辅助治疗、Rh血型鉴定、抗炎治疗、细胞分离等方面有非常重要的用途。由于番木瓜乳汁中含有的四种巯基蛋白酶在结构、性质等方面十分相似，因而分离木瓜凝乳蛋白酶比较困难。尽管目前已能分离到纯木瓜凝乳蛋白酶，但分离方法的步骤都较为繁琐，不仅对酶的分离不利而且仅适用于小规模制备。本研究从木瓜蛋白酶粗品中利用离子交换层析和超滤两步分离，冷冻干燥后得到木瓜凝乳蛋白酶，简化了分离步骤，对于木瓜凝乳蛋白酶的大规模生产有着重要的意义。 近年来研究报道木瓜蛋白酶可用于癌症放化疗的辅助治疗。由于木瓜凝乳蛋白酶在结构上比木瓜蛋白酶多一个自由的巯基，具有水解活性高、耐酸及热稳定性好等特点，因此具有更高的药用价值。 本研究用MTT法分析了木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶与五种化疗药物，即5-氟尿嘧啶（5-Fu）、氨甲喋呤（MTX）、平阳霉素（PYM）、长春新碱（VCR）和卡铂（CBP），单独或联合使用对小鼠腹水型肝癌H22细胞的杀伤作用，发现木瓜凝乳蛋白酶对H22细胞的杀伤作用高于木瓜蛋白酶；木瓜凝乳蛋白酶与五种化疗药物对H22胞的协同杀伤作用均呈浓度依赖性；木瓜凝乳蛋白酶对五种化疗药物均具增敏作用。在加药培养至48h时，酶对五种化疗药物杀伤肿瘤细胞的促进效果达到最佳。 利用MTT法测定木瓜凝乳蛋白酶和5-Fu、MTX单独或联合使用对人肝癌细胞BEL-7402的杀伤作用，得出：木瓜凝乳蛋白酶对人肝癌细胞BEL-7402的杀伤作用呈浓度依赖性；选取对BEL-7402细胞无明显杀伤作用的木瓜凝乳蛋白酶浓度，与5-Fu或MTX两种化疗药物联合使用，比化疗药物单独使用对BEL-7402细胞的杀伤作用更大，即木瓜凝乳蛋白酶能增强5-Fu和MTX对BEL-7402的杀伤作用。 初步观察木瓜凝乳蛋白酶和5-Fu联合用药对BALB／c小鼠抗肝癌腹水肝癌H22的治疗作用，发现木瓜凝乳蛋白酶与5-Fu联合使用可以延长腹水肝癌小鼠的生存期，并减少5-Fu对小鼠的毒副作用。 Rh血型系统是是临床上重要的血型系统之一。Rh抗原有40多种类型，主要的是RhD，RhC／c，RhE／e。用分离得到的木瓜凝乳蛋白酶进行Rh血型鉴定、IgG抗D抗体效价测定、抗体特异性鉴定和交叉配血试验，并均与传统抗人球蛋白法作对照，结果一致，表明木瓜凝乳蛋白酶可应用于Rh血型的诊断。