激素具有促进动物增重，增加蛋白质沉积和减少脂肪沉积的作用，曾被广泛作为动物饲料添加剂使用，以提高饲料转化率，促进动物生长。但激素类化合物在生物体内不易降解，长期食用含有激素的食品对人体健康将产生严重的影响。20世纪80年代以来，许多国家和组织通过立法来限制或禁止在食品动物中使用激素。但由于利益的驱使，在世界范围内激素仍被大量滥用[1]。因而，研究和建立各种激素残留的快速、准确、灵敏的分析测试方法具有非常重要的现实意义。　　 本研究建立了高效液相色谱同时测定禽肉及饲料中五种激素残留的方法。实验考察了流动相的组成、配比、流速、pH值、柱温及检测波长对五种激素类化合物的分离测定的影响。确定的最佳色谱条件为：采用Nova-PakC18柱，紫外检测器，检测波长224nm和260nm，以甲醇/水为流动相，采用梯度洗脱方式，柱温32℃，流动相流速1.0mL/min,进样量10μL。在最佳色谱条件下，绘制了标准曲线，其线性范围0.08～100.0μg/mL,线性相关系数0.9991～0.9995，平均回收率75.2～98.3％，相对标准偏差1.6～3.3％。该法于23min内实现了同时测定鸡饲料、猪饲料、牛饲料及鸡肉样品中炔雌醇、苯甲酸雌二醇、己烯雌酚、黄体酮和醋酸氯地孕酮五种激素类化合物。　　 本研究同时建立了禽肉及饲料中炔雌醇和醋酸氯地孕酮的导数光谱分析法。通过仪器参数及显色条件的优化，确定以浓硫酸为显色剂，采用固相萃取-二阶导数光谱对两种化合物进行分析，其它实验条件为：显色剂用量2.0mL;反应时间10min；光谱稳定时间10～15min;固相萃取柱填料为中性氧化铝，10mL的二氯甲烷-甲醇溶液(50％,v/v)为洗脱液。在最佳实验条件下，炔雌醇和醋酸氯地孕酮在0.3～10.0μg/mL范围内线性关系良好，r分别为0.9974和0.9991，相对标准偏差分别为6.8％和7.2％。用于实际样品分析，炔雌醇的平均回收率82.0～88.6％，醋酸氯地孕酮的平均回收率83.6～95.2％。　　 研究结果表明，高效液相色谱法灵敏度高、分析速度快、精密度良好，适用于多种激素类化合物的同时测定。导数光谱法仪器操作简单、分析成本低，可用于同时测定样品中的炔雌醇和醋酸氯地孕酮的含量。