哺乳动物精子根据携带染色体不同可分为X精子和Y精子,研究表明这两种类精子在体型大小、运动路径、细胞表面电荷与抗原等方面均存在差异,这些表型上的差异可能是由精子中蛋白的差异表达造成的,目前对X精子和Y精子中差异表达蛋白的相关研究长期处于停滞状态,因此开展差异表达蛋白的研究对探索相关生物学原理具有重要意义。本试验通过qPCR技术建立一种利用SRY基因和AKAP4基因对猪性控精子检测的方法,对蛋白组学分析所用的性控精子样本进行纯度检测,样本分X性控精子（P.xgro）和Y性控精子（P.ygro）组共两个组别,利用TMT标记、高效液相色谱分级技术、基于质谱的蛋白质组学技术和生物信息学分析对两组性控精子样本的蛋白组进行分析,并选取分别在P.xgro中高表达的蛋白RPS8、RPS12和在P.ygro中高表达的蛋白COX6A1、RPS9,进行免疫蛋白印迹试验,对TMT蛋白组学结果进行验证分析。主要结果如下:（1）利用qPCR法建立了分别利用SRY基因和AKAP4基因检测性控精子纯度的方法,检测了 P.xgro和P.ygro试验组中3次生物学重复的性控精子纯度。（2）建立了杜洛克猪性别分选精子（X精子和Y精子）的差异表达蛋白质谱图库,鉴定和筛选出多个潜在关键蛋白质。（3）蛋白组学图谱分析共鉴定到15106条肽段,其中特异性肽段14366条;共鉴定到的蛋白2489个,有2199个包含定量信息,在P.ygro和P.xgro试验组中蛋白表达倍数介于0.167～2.324之间,未发现精子中特异表达蛋白,定量到的差异表达蛋白共有177个。（4）利用生物信息学软件对差异表达蛋白进行富集分析,结果显示RPS8、RPS9、RPS12、RPL10A等10个差异表达蛋白与线粒体相关;COX6C、COX7B、ATP6V0C、COX6A1、MT-ND5共5个与氧化磷酸化相关的蛋白,涉及能量代谢;MMP7、CALR、TRRAP、CANX和VDAC1共5个差异表达蛋白与疾病有关。（5）采用免疫蛋白印迹对差异表达蛋白进行验证,验证结果与蛋白质组学分析结果一致,说明TMT标记蛋白组学对两种精子差异表达蛋白的检测结果准确可信。以上研究结果得出如下结论:本试验建立了性控精液检测的方法和杜洛克猪分选精子的差异表达蛋白质谱图库,鉴定并筛选出多个潜在关键蛋白质,为进一步研究猪性控精子分子调节机理提供一定的理论参考。未发现在X精子中或Y精子中特异表达的蛋白;49个在Y精子中高表达,128个在X精子中高表达;差异表达的蛋白中,RPS8、COX6C、ATP6V0C等差异表达蛋白涉及能量代谢过程,为精子运动等提供能量,可能是导致X精子和Y精子的运动速度和运动方式不同的原因。