多通道生物传感芯片用于检测急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因的实验研究

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急性早幼粒细胞白血病(APL)是急性髓细胞白血病(AML) FAB分型中的M3亚型,APL患者具有独特的细胞形态学、细胞遗传学和分子生物学特征。95%以上的APL患者具有特征性的t (15;17)染色体易位,该染色体易位分别累及15号染色体上的PML基因和17号染色体上的RARα基因,最终导致PML/RARα融合基因的形成。PML/RARα融合基因是APL特异的分子学标志,因此检测PML/RARα融合基因具有重要意义。传统形态学及常规PCR技术不能对其定量分析,所以研究新的检测方法是目前白血病诊断领域的热点课题。DNA电化学生物传感器是近几年迅速发展起来的一种生物传感器,它具有测定灵敏、价廉等优点,但每次只能实现单体系检测且重现性不好。多通道生物传感芯片是由多个通道构成,每一通道都是一个传感器的探头,具有快速、高效、高通量及并行处理的能力,因此具有非常广阔的应用前景。为了研究PML/RARα融合基因在多通道生物传感芯片上的检测,本文首先开发多通道生物传感芯片的整个检测系统,进行了多通道生物传感芯片检测的方法学研究,并开展多通道生物传感芯片用于检测APL的PML/RARα融合基因的前期实验研究。本文分别采用了共价键合联合杂交指示剂法、电聚合联合杂交指示剂法、自组装膜联合酶法用于检测APL的PML/RARα融合基因,实验结果表明,以上方法均具有较高的灵敏度和较好的选择性。通过比较以上几种方法,选择其中相对较简便且对芯片兼容性较好的自组装膜联合酶法用于多通道生物传感芯片上电信号的检测。在采用多通道生物传感芯片检测APL的PML/RARα融合基因的实验研究中,首先进行多通道生物传感芯片上各通道电化学行为的一致性研究,然后采用自组装膜联合酶法,对目标链加入前后进行对比研究,最后在多通道生物传感芯片上对方法的特异性及线性进行研究,为多通道生物传感芯片上进行APL的PML/RARα融合基因的实际样品及其他基因的检测提供研究基础。
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