【摘 要】
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鸡蛋花鞘锈菌Coleosporium plumeriae引起的鸡蛋花锈病是鸡蛋花的主要病害之一,染病鸡蛋花叶片正面出现淡黄色圆形小斑,叶片背面可观察到橙黄色粉末状夏孢子堆,发病叶片提前脱落,树势变弱,观赏价值降低。有重寄生现象的鸡蛋花锈病叶片背面的夏孢子堆上覆盖着白色菌丝体。本研究分离鸡蛋花鞘锈菌的重寄生真菌并鉴定其种类,验证其重寄生性,测定其寄主范围,优化其人工培养条件,测定其重寄生率,为鸡蛋花
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鸡蛋花鞘锈菌Coleosporium plumeriae引起的鸡蛋花锈病是鸡蛋花的主要病害之一,染病鸡蛋花叶片正面出现淡黄色圆形小斑,叶片背面可观察到橙黄色粉末状夏孢子堆,发病叶片提前脱落,树势变弱,观赏价值降低。有重寄生现象的鸡蛋花锈病叶片背面的夏孢子堆上覆盖着白色菌丝体。本研究分离鸡蛋花鞘锈菌的重寄生真菌并鉴定其种类,验证其重寄生性,测定其寄主范围,优化其人工培养条件,测定其重寄生率,为鸡蛋花锈病及其他作物锈病的生物防治提供理论依据。研究结果如下:1.鉴定出鸡蛋花鞘锈菌的重寄生真菌为Simplicillium subtropicum。经分离和单孢纯化后,结合鸡蛋花鞘锈菌重寄生真菌的形态特征和ITS、SSU和LSU的3个片段的核酸序列分析,将鸡蛋花鞘锈菌重寄生真菌鉴定为S.subtropicum。这是首次报道S.subtropicum为鸡蛋花鞘锈菌的重寄生真菌。2.用S.subtropicum接种11种植物锈病菌,发现仅3种锈病菌被重寄生。用S.subtropicum接种香茶菜鞘锈菌、鸡矢藤鞘锈菌、落叶松杨栅锈菌、多堆柄锈菌、屈恩柄锈菌、美人蕉柄锈菌、两栖蓼柄锈菌、葡萄层锈菌、刺李疣双胞锈菌、无花果蜡锈菌和略小柄锈菌共11种植物锈病菌,发现仅香茶菜鞘锈菌、鸡矢藤鞘锈菌和落叶松杨栅锈菌被重寄生。这是首次发现S.subtropicum是该3种植物锈病菌的重寄生真菌。3.明确了S.subtropicum在琼脂培养基平板上,菌落直径最大的基本条件。在供试的10种培养基上,S.subtropicum在发酵专用燕麦粉琼脂培养基上28℃培养7 d的菌落直径最大。以察氏培养基为基础培养基,28℃培养7 d,发现菌落直径最大的碳氮源分别为可溶性淀粉和牛肉膏。在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上,其最适培养条件为:培养基p H为6和温度为28℃;黑暗培养会促进菌落生长。4.明确了S.subtropicum的液体及固态培养的最大产孢量基本条件。在供试的20种液体培养基中,S.subtropicum在2%米皮糠液体培养基中产孢量最大。以察氏液体培养基为基础培养基,发现当碳源为可溶性淀粉、氮源为牛肉膏、蛋白胨或胰蛋白胨时,S.subtropicum的产孢量最大;其中,产孢量最大的可溶性淀粉和牛肉膏的比例为20:9。在米皮糠液体培养基中,最适产孢的基本条件分别为分生孢子液浓度为1×10~8个/m L的初接种量为8 m L、震荡培养器转速为200 r/min、培养时间为7 d和液体p H 7。在供试的10种固态培养基中,S.subtropicum在玉米粉麦麸培养基中产孢量最大;其中,产孢量最大的料水比为1:1.2。产孢量最大的补充碳源为可溶性淀粉,氮源可选择胰蛋白胨、牛肉膏或蛋白胨。5.用液体培养的S.subtropicum分生孢子液分别在室内及田间喷洒鸡蛋花锈病叶背的夏孢子堆,喷洒后7 d观察和统计其对鸡蛋花鞘锈菌的重寄生率。在室内离体条件下,分生孢子液浓度为1.0×10~6个/m L、自米皮糠液体培养基上产生的分子孢子对鸡蛋花鞘锈菌的重寄生率最高,为86.00%。在田间条件下,在米皮糠培养基中的S.subtropicum分生孢子液对鸡蛋花鞘锈菌的重寄生率为64.23%。
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