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为了提高胃癌淋巴结微转移的检出率,从分子水平上把握肿瘤分期,探讨上皮性标志CK18 mRNA检测胃癌淋巴结微转移的临床意义,本研究应用实时荧光定量PCR方法(RTFQ-PCR)建立了CK18 RTFQ-PCR标准曲线,定量检测CK18 mRNA的表达水平。结果显示:(1)应用RTFQ-PCR标准曲线检测CK18 mRNA灵敏度达10个拷贝、CV值2.13%、具有可重复性。(2)胃良性病变淋巴结CK18 mRNA表达全部阴性,胃癌组织CK18 mRNA表达全部阳性,表明CK18可以作为胃癌淋巴结微转移基因标志。胃癌淋巴结CK18 mRNA拷贝数在无转移组是0,微转移组和转移组CK18mRNA表达水平依次提高,表明淋巴结CK18 mRNA拷贝数能够显示转移癌细胞的数量和增殖状态。(3)病理诊断无转移的淋巴结中检测出有22.11%(44/199枚)CK18mRNA表达阳性,分子水平上反映常规病理诊断无淋巴结转移患者中检测出有62.50%(15/24例)的患者已存在淋巴结微转移,分子水平检测微转移使33.33%(8/24例)的胃癌患者TNM分期改变。(4)淋巴结CK18 mRNA拷贝数与TNM分期呈正相关(r=0.584)。(5)15例诊断微转移胃癌患者CK18 mRNA表达水平存在差异,本研究将CK18 mRNA>104定义为非冬眠癌细胞,具有增殖形成转移病灶的功能,那么,86.67%(13/15例)胃癌患者CK18 mRNA超过104,可形成转移病灶。本研究首次提出胃癌淋巴结CK18 mRNA的RTFQ-PCR定量能指示转移癌细胞的数量,可能精确和敏感地鉴定淋巴结微转移程度。首次提出淋巴结CK18 mRNA拷贝数与胃癌TNM分期有关,能反映淋巴结转移程度,具有重要的临床意义。此外,RTFQ-PCR定量检测CK18 mRNA还能显示微转移癌细胞数在不同患者个体间存在的差别明显,提示临床对于CK18 mRNA>104非冬眠癌细胞需给与高度关注。