植物乳杆菌ZJ316中抗菌物质的分离纯化及抗菌机制研究

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本研究运用大孔树脂XAD-2、固相萃取(SPE)、反相高效液相色谱(RP-HPLC)三步分离法,从植物乳杆菌ZJ316发酵上清成功纯化获得天然抗菌物质——苯基乳酸(Phenyllactic acid),纯度达98.14%,提取量为108.87 mg/L。经手性色谱法确定该苯基乳酸中L型和D型比例为94.043%:5.957%。研究发现苯基乳酸具有广谱抗菌性,能有效抑制革兰氏阳性菌、阴性菌及部分真菌,对食源性致病菌金黄色葡萄球菌D48和肠炎沙门氏菌肠炎亚种ATCC14028抗菌效果尤为显著,最小抗菌浓度分别为1.50 mg/mL和2.00 mg/mL。以金黄色葡萄球菌D48和肠炎沙门氏菌肠炎亚种ATCC 14028为指示菌,利用扫描电镜和透射电镜观察微观结构的变化,发现经苯基乳酸处理的指示菌细胞壁和细胞膜均有破损,形成膜通道,胞内电解质外流。抗菌机制研究表明,经苯基乳酸处理的指示菌细胞胞外电导率急剧升高,胞内ATP水平迅速降低,跨膜电势差(△ψ)和质子浓度梯度(△pH)瞬间坍塌。综上,细胞膜破裂致使膜内容物泄露是苯基乳酸的抗菌作用模式。
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