【摘 要】
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临床采用活血化瘀药丹参治疗RA取得了较好疗效。为进一步探讨其作用机制,观察丹参对体外培养佐剂性关节炎(AIA)大鼠滑膜细胞增殖及其对滑膜Bcl-2/Bax基因表达的影响。常规培
【机 构】
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中国人民解放军白求恩国际和平医院;
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临床采用活血化瘀药丹参治疗RA取得了较好疗效。为进一步探讨其作用机制,观察丹参对体外培养佐剂性关节炎(AIA)大鼠滑膜细胞增殖及其对滑膜Bcl-2/Bax基因表达的影响。常规培养AIA大鼠成纤维样滑膜细胞株,实验用3~5代滑膜细胞。MTT比色分析法测定丹参、甲氨喋呤对滑膜细胞增殖影响的量效关系和时效关系。调整细胞浓度为1×10~5个/ml的细胞悬液2ml加入放有盖玻片的6孔板中,培养24小时,吸出培养液,分别加入含丹参(1.0mg/ml)、甲氨喋呤(1.0umol/L)的血清,同时设空白对照组,继续培养72小时,取出盖玻片,用PBS清洗2次,用0.4%多聚甲醛固定,密封;免疫组化法检测丹参(1.0mg/ml)、甲氨喋呤(1.0umol/L)对成纤维样滑膜细胞Bcl-2和Bax基因表达的作用。结果显示丹参(1.0mg/ml)可明显抑制大鼠成纤维样滑膜细胞的增殖,且具有量效关系(P<0.05);甲氨喋呤亦可显著抑制滑膜细胞增殖,但与剂量无明显依赖关系。丹参和甲氨喋呤均在第72h对滑膜细胞增殖抑制最明显。丹参(1.0mg/ml)和甲氨喋呤1.0umol/L可上调大鼠成纤维样滑膜细胞Bax基因表达,标记指数分别为(28.4±2.07)%、(23.6±1.84)%,下调Bcl-2基因表达,标记指数分别为(5.8±2.5)%、(6.4±1.14)%,与正常组比较有显著差异(P<0.05)。表明丹参对AA大鼠体外培养成纤维样滑膜细胞增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性;其作用机制可能与其调控Bcl-2和Bax凋亡基因表达有关。
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