快速定量PCR检测巨细胞病毒感染试剂盒的建立

来源 :第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:marsxwj
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目的:建立快速、灵敏、定量检测巨细胞病毒的方法,并形成检测试剂盒。方法:使用TaqMan探针技术,选择保守序列CMV-pp65设计引物,荧光定量病毒载量。对该检测系统进行灵敏度、重复性和特异性等测试,并检测31份临床阳性标本和106份正常献血者标本。结果:检测灵敏度为358copies/ml,CV%值在1%左右,特异性好,临床标本符合率为100%。结论:表明本检测系统特异性好,准确性高,适用于病毒检测,可与临床治疗相结合。
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目的:探讨乙肝疫苗长期免疫地区人群HBV流行规律的变化趋势。方法:整群抽样结合横断面调查,用固相放射免疫法检测研究对象血清HBV感染指标并进行分析。结果:(1)平均HBsAg阳性率为7.5%,0~19岁人群HBV感染指标显著低于≥20岁人群。(2)0~19岁人群HBsAg阳性率1985年高于2005年;1985年的抗-HBs水平随着年龄增长而升,从1-岁组的12.4%到60~岁组的53.8%,而2
目的:初步确定流行于山西地区的乙肝病毒的基因型的基本情况。方法:采集山西地区乙型肝炎表面抗原阳性的血清,利用PCR扩增得到HBV的S基因和C基因;用MEGA3软件对其进行核苷酸序列分析,构建系统发生树,分析基因型。结果:约93%样本的HBV S基因和C基因序列均位于HBV系统发生树的基因型C,近7%的样本其S基因和C基因序列位于系统发生树的基因型B。结论:流行于山西地区的乙肝病毒多数为基因型C,少
目的:标定乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)定量血清。方法:选择一份HBsAg阳性,抗-HBs、抗-HCV均为阴性的血清,以WH0表面抗原定量血清为标准,经4次独立标定,以双平行线法计算,得到待标定HBsAg定量血清的浓度。结果:经4次标定,标准血清浓度为5.56IU/ml,变异系数CV为5%,加速热稳定试验表明其抗原活性在-70℃可以稳定保存4年。用该份乙肝表面抗原定量血清评价国内外六家HBsA
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目的:构建携带HBVC基因的重组MVA假病毒颗粒,为进一步评价其作为基因治疗工具的价值奠定基础。方法:将HBVC基因通过基因重组构建入穿梭载体pSC11,得到质粒pSC11-C,将此质粒转染MVA病毒感染的原代鸡胚细胞单层,通过同源重组得到MVA-C,采用特异性PCR鉴定重组病毒。经过X-gal筛选,9次克隆传代得到单克隆重组病毒。将病毒培养物经蔗糖梯密度离心纯化后滴定病毒滴度。结果:采用PCR和
在检验工作中,经常会遇到溶血的标本,其对很多检验项目如r-GT,乳酸脱氢酶,K等的检验结果的影响已不容质疑,但对ELISA检测乙肝表面抗原是否有影响,虽然很多文献有报导,但说法不一致,本文对溶血标本对ELISA检测乙肝表面抗原是否有影响及标本溶血原因进行讨论交流。
目的:对重组乙肝VR1012/EHNⅡ/前C-C基因疫苗(VEC)中的蛋白酶切位点进行点突变,并通过动物试验研究突变型前C-C基因疫苗的免疫效果。方法:采用单引物二次PCR法对质粒VEC依次进行基因点突变,得到151+154(VE2)、151+154+164+167点突变(VE4)2种突变型疫苗,转染HepG2细胞并免疫Balb/c小鼠。通过细胞免疫化学、酶联免疫分析、免疫印迹、酶免疫斑点、细胞杀
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目的:对珠海丽珠试剂公司研发的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)确认试剂盒(中和试验法)进行初步临床试验,观察其应用价值。方法:血清样本来源于本院门诊病人(包括体检者),经用上海科华公司生产的HBsAg ELISA试剂盒测定,结果呈阳性。确认方法参照丽珠公司提供的说明书进行。结果:133例样本中确认为阳性的99例(74.43%),其中有4例常规确认试验结果为"不确定",但经延长时间的确认试验,均确
目的:分析戊型肝炎病毒各生物志物之间关系以及各标志物在早期诊断中的作用。方法:从临床收集急性散发性肝炎患者的血清,用酶联免疫试剂检测戊肝病毒IgG抗体、IgM抗体和抗原,用实时荧光RT-PCR方法检测核酸,比较其相关关系。结果:在121例急性散发性肝炎中,HEV IgM抗体阴性者为51例,其中抗原或/和核酸阳性者占45.1%;IgM抗体阳性者70份,其中抗原或/和核酸阳性者占67.1%。HEV I