【摘 要】
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研究高表达Islet-1之后的C3H10T1/2细胞定向分化为心肌细胞过程中表达增加的心肌特异蛋白基因上组蛋白乙酰化水平的变化情况。Islet-1基因慢病毒转染小鼠骨髓间充质干细胞C3H
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所; 重庆医科大学附属儿童医院心脏内科;
【基金项目】
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国家自然科学基金(30973219);重庆市自然科学基金重点项目(CSTC,2009BA5084)
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研究高表达Islet-1之后的C3H10T1/2细胞定向分化为心肌细胞过程中表达增加的心肌特异蛋白基因上组蛋白乙酰化水平的变化情况。Islet-1基因慢病毒转染小鼠骨髓间充质干细胞C3H10,逆转录及实时荧光定量PCR时序性检测出心肌特异性蛋白基因GATA4,NKX2.5,MEF2c的mRNA表达达高峰的两周时间点,采用染色质免疫共沉淀技术(ChromatinImmunoprecipitation,CHIP),用CHIP级乙酰化H3抗体免疫沉淀与其所结合的DNA,采用实时荧光定量PCR扩增抗体所富集的心肌特异性蛋白基因GATA4,NKX2.5,MEF2c启动子区域的DNA量,比较转染组和未转染组与抗体所结合的上述三种心肌特异蛋白基因的差异性表达。转染高表达Islet-1的C31H 10T1/2细胞两周后,乙酰化的H3抗体所结合的心肌特异性蛋白基因GATA4,NKX2.5,MEF2c与未转染Islet-1的细胞组相比较,表达增加。结论高表达Islet-1之后C3H10T1/2细胞定向分化为心肌细胞过程中表达增加的心肌特异蛋白基因上组蛋白乙酰化水平增高。
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